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2V6.11
Tissu
Rein fœtal
Site métastatique
Sans objet (rein fœtal ; dérivé non tumorigène de la lignée cellulaire HEK293)

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2V6.11

Cell line · Référence du produit 305147

Les cellules 2V6.11 ont été dérivées de la lignée cellulaire rénale embryonnaire humaine HEK-293 en 2001. La lignée cellulaire 2V6.11 constitue une ressource précieuse pour l'étude de la protéine E4 de l'adénovirus...

€800.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

les cellules 2v6.11 ont été dérivées de la lignée rénale embryonnaire humaine HEK-293 en 2001. La lignée cellulaire 2V6.11 est une ressource précieuse pour l'étude de l'oncoprotéine adénovirale E4, en particulier la protéine E4 34K connue pour être impliquée dans la maintenance et la réparation du génome cellulaire. les cellules 2V6.11, obtenues par transfection avec le plasmide pVgRxR suivi de pEKORF6, entraînent l'expression inductible de la protéine E4 34K, qui est liée à l'inhibition des mécanismes cellulaires qui réparent les cassures double brin de l'ADN. La lignée cellulaire 2V6.11 a démontré que les protéines adénovirales E4 34k et E1b 55k inhibent la réparation de l'ADN chromosomique en perturbant la jonction non homologue (NHEJ) et en déstabilisant les protéines de réparation de l'ADN, étendant leur effet de l'ADN extrachromosomique à l'ADN génomique cellulaire.

La lignée cellulaire inductible 2V6.11, avec sa morphologie épithéliale adhérente, est idéale pour étudier le comportement et les caractéristiques des cellules épithéliales dérivées du rein, y compris leur réponse aux infections par l'adénovirus humain 40. Cette lignée cellulaire polyvalente, qui peut être détectée par western blot, permet aux chercheurs d'étudier les mécanismes moléculaires par lesquels l'oncoprotéine E4 de l'adénovirus inhibe les processus de réparation, contribuant ainsi à notre compréhension de la pathologie de l'adénovirus et à la possibilité de développer de nouvelles stratégies thérapeutiques.

Tissu
Rein fœtal
Site métastatique
Sans objet (rein fœtal ; dérivé non tumorigène de la lignée cellulaire HEK293)
Applications
Études sur l'oncoprotéine E4 de l'adénovirus ; recherches sur la réparation des cassures double brin de l'ADN ; études sur la voie NHEJ ; systèmes d'expression inductibles de la protéine E4 de 34 kDa ; virologie ; pathologie de l'adénovirus

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Type de cellule
Cellules épithéliales

04Identifiants

Référence
2V6.11 (numéro de catalogue Cytion 305147)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Manipulation et culture

Milieu de culture
EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2.2 g/L NaHCO3, w : EBSS (numéro d'article Cytion 820100a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Rapport de fractionnement
1 à 5
Densité de semis
1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
Fœtus