Gå direkt till innehållet
2V6.11
Vävnad
Fetal njure
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (fosternjure; icke-tumörbildande HEK293-derivat)

2V6.11

Cell line · Produktnummer 305147

2V6.11-cellerna härstammar från den humana embryonala njurcellinjen HEK-293 och isolerades år 2001. Cellinjen 2V6.11 är en värdefull resurs för studier av adenovirusets E4...

€800.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

2v6.11-cellerna härstammar från den humana embryonala njurlinjen HEK-293 från 2001. Cellinjen 2V6.11 är en värdefull resurs för studier av det adenovirala E4-onkoproteinet, särskilt E4 34K-proteinet som är känt för att vara involverat i underhåll och reparation av cellgenom. 2V6.11-celler, som erhållits genom transfektion med plasmiden pVgRxR följt av pEKORF6, resulterar i ett inducerbart uttryck av E4 34K-proteinet, vilket är kopplat till hämning av cellulära mekanismer som reparerar dubbelsträngsbrott i DNA. Cellinjen 2V6.11 visade att de adenovirala proteinerna E4 34k och E1b 55k hämmar kromosomal DNA-reparation genom att störa NHEJ (non-homologous end joining) och destabilisera DNA-reparationsproteiner, vilket utvidgar deras effekt från extrakromosomalt till cellulärt genomiskt DNA.

Den inducerbara cellinjen 2V6.11, med sin adherenta epitelmorfologi, är idealisk för att undersöka beteende och egenskaper hos epitelceller från njurar, inklusive deras svar på infektioner med humant adenovirus 40. Denna mångsidiga cellinje, som kan detekteras med western blot, gör det möjligt för forskare att fördjupa sig i de molekylära mekanismer genom vilka adenovirus E4-onkoproteinet hämmar reparationsprocesser, vilket bidrar till vår förståelse av adenoviruspatologi och potentialen för att utveckla nya terapeutiska strategier.

Vävnad
Fetal njure
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (fosternjure; icke-tumörbildande HEK293-derivat)
Ansökningar
Studier av adenovirusets E4-onkoprotein; forskning om reparation av dubbelsträngsbrott i DNA; studier av NHEJ-vägen; inducerbara uttryckssystem för E4 34k; virologi; adenoviruspatologi

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Epiteliala celler

04Identifierare

Källa
2V6.11 (Cytion katalognummer 305147)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Uppdelningsförhållande
1 till 5
Såtäthet
1 till 3 × 10⁴ celler/cm²
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
Foster