Ga naar de inhoud
2V6.11
Weefsel
Foetale nier
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (foetale nier; niet-tumorogene afgeleide van HEK293)

Documenten

2V6.11

Cell line · Productnummer 305147

De 2V6.11-cellen zijn in 2001 afgeleid van de menselijke embryonale niercellijn HEK-293. De 2V6.11-cellijn is een waardevolle bron voor onderzoek naar het adenovirale E4-eiwit...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

2v6.11 cellen werden afgeleid van de menselijke embryonale nierlijn HEK-293 in 2001. De 2V6.11 cellijn is een waardevolle bron voor het bestuderen van het adenovirale E4 oncoproteïne, met name het E4 34K eiwit waarvan bekend is dat het betrokken is bij cellulair genoombehoud en -herstel. 2V6.11-cellen, verkregen door transfectie met het plasmide pVgRxR gevolgd door pEKORF6, resulteren in induceerbare expressie van het E4 34K-eiwit, dat in verband wordt gebracht met de remming van cellulaire mechanismen die dubbelstrengsbreuken in DNA repareren. De 2V6.11 cellijn toonde aan dat de adenovirale eiwitten E4 34k en E1b 55k chromosomaal DNA-herstel remmen door het verstoren van non-homologous end joining (NHEJ) en het destabiliseren van DNA-herstellingseiwitten, waardoor hun effect zich uitbreidt van extrachromosomaal naar cellulair genomisch DNA.

De 2V6.11 induceerbare cellijn, met hun adherente epitheliale morfologie, zijn ideaal voor het onderzoeken van het gedrag en de eigenschappen van nier-afgeleide epitheelcellen, inclusief hun reactie op infecties door humaan adenovirus 40. Deze veelzijdige cellijn, die kan worden gedetecteerd door middel van western blot, stelt onderzoekers in staat om de moleculaire mechanismen te onderzoeken waarmee de adenovirus E4 oncoproteïne herstelprocessen remt, en zo bij te dragen aan ons begrip van de pathologie van adenovirus en het potentieel voor de ontwikkeling van nieuwe therapeutische strategieën.

Weefsel
Foetale nier
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (foetale nier; niet-tumorogene afgeleide van HEK293)
Toepassingen
Onderzoek naar het E4-oncoproteïne van het adenovirus; onderzoek naar het herstel van dubbelstrengsbreuken in het DNA; onderzoek naar de NHEJ-route; induceerbare E4-34k-expressiesystemen; virologie; adenoviruspathologie

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epitheelcellen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
2V6.11 (Cytion catalogusnummer 305147)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 5
Zaaidichtheid
1 tot 3 × 10⁴ cellen/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
Foetus