Перейти до вмісту
2V6.11
Тканина
Ембріональна нирка
Місце метастазування
Не застосовується (нирка плода; непухлинний похідний штам HEK293)

Документи

2V6.11

Cell line · Номер товару 305147

Клітини 2V6.11 були отримані з лінії ембріональних нирок людини HEK-293 у 2001 році. Клітинна лінія 2V6.11 є цінним ресурсом для вивчення аденовірусного білка E4...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

клітини 2v6.11 були отримані з лінії ембріональних нирок людини HEK-293 у 2001 році. Клітинна лінія 2V6.11 є цінним ресурсом для вивчення аденовірусного онкопротеїну E4, зокрема білка E4 34K, який, як відомо, бере участь у підтримці та репарації клітинного геному. клітини 2V6.11, отримані шляхом трансфекції плазмідою pVgRxR з наступною трансфекцією pEKORF6, призводять до індуцибельної експресії білка E4 34K, що пов'язано з пригніченням клітинних механізмів репарації дволанцюгових розривів в ДНК. Клітинна лінія 2V6.11 продемонструвала, що аденовірусні білки E4 34k і E1b 55k інгібують репарацію хромосомної ДНК, порушуючи приєднання негомологічних кінців (NHEJ) і дестабілізуючи білки репарації ДНК, поширюючи свій вплив з позахромосомної на клітинну геномну ДНК.

Індуцибельна клітинна лінія 2V6.11, з її адекватною епітеліальною морфологією, ідеально підходить для дослідження поведінки і характеристик епітеліальних клітин нирок, включаючи їх відповідь на інфікування аденовірусом людини 40. Ця універсальна клітинна лінія, яку можна виявити за допомогою вестерн-блоту, дозволяє дослідникам заглибитися в молекулярні механізми, за допомогою яких онкопротеїн аденовірусу E4 пригнічує процеси репарації, що сприяє нашому розумінню аденовірусної патології та потенціалу для розробки нових терапевтичних стратегій.

Тканина
Ембріональна нирка
Місце метастазування
Не застосовується (нирка плода; непухлинний похідний штам HEK293)
Застосування
Дослідження онкопротеїну E4 аденовірусу; дослідження репарації дволанцюгових розривів ДНК; дослідження шляху NHEJ; системи індукованої експресії E4 34k; вірусологія; патологія аденовірусу

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
2

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Епітеліальні клітини

04Ідентифікатори

Посилання
2V6.11 (номер за каталогом Cytion 305147)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_6355

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Коефіцієнт розподілу
від 1 до 5
Щільність висіву
від 1 до 3 × 10⁴ клітин/см²
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Вік донора
Плід