Tartalomra ugrás
2V6.11
Szövet
Magzati vese
Áttétes hely
Nem alkalmazható (magzati vese; nem tumorogén HEK293-származék)

Dokumentumok

2V6.11

Cell line · Termékszám 305147

A 2V6.11 sejtek 2001-ben az emberi embrionális vese HEK-293 sejtvonalból származnak. A 2V6.11 sejtvonal értékes forrás az adenovírus E4 fehérje vizsgálatához...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

a 2v6.11 sejteket 2001-ben a HEK-293 humán embrionális vese vonalból származtatták. A 2V6.11 sejtvonal értékes forrás az adenovírus E4 onkoprotein, különösen az E4 34K fehérje tanulmányozására, amelyről ismert, hogy részt vesz a sejtek genomjának fenntartásában és javításában. a 2V6.11 sejtek, amelyeket a pVgRxR plazmiddal, majd a pEKORF6 plazmiddal történő transzfekcióval nyertek, az E4 34K fehérje indukálható expresszióját eredményezik, amely a DNS kettős szálszakadásainak javítását végző sejtmechanizmusok gátlásához kapcsolódik. A 2V6.11 sejtvonalon bebizonyosodott, hogy az E4 34k és az E1b 55k adenovírusfehérjék gátolják a kromoszómális DNS-javítást a nem-homológ végcsatlakozás (NHEJ) megzavarásával és a DNS-javító fehérjék destabilizálásával, kiterjesztve hatásukat az extrachromoszómális DNS-ről a sejt genomiális DNS-re.

A 2V6.11 indukálható sejtvonal, tapadó epiteliális morfológiájával ideális a veséből származó epiteliális sejtek viselkedésének és jellemzőinek vizsgálatára, beleértve a humán adenovírus 40 által okozott fertőzésekre adott válaszukat is. Ez a sokoldalú, western blot segítségével kimutatható sejtvonal lehetővé teszi a kutatók számára, hogy elmélyedjenek azokban a molekuláris mechanizmusokban, amelyek révén az adenovírus E4 onkoprotein gátolja a javítási folyamatokat, hozzájárulva ezzel az adenovírus patológiájának megértéséhez és az új terápiás stratégiák kifejlesztésének lehetőségéhez.

Szövet
Magzati vese
Áttétes hely
Nem alkalmazható (magzati vese; nem tumorogén HEK293-származék)
Alkalmazások
Az adenovírus E4 onkoproteinjével kapcsolatos kutatások; a DNS kettős szálú törésének javításával kapcsolatos kutatások; az NHEJ-útvonal vizsgálata; indukálható E4 34k expressziós rendszerek; virológia; adenovírus-patológia

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epithel sejtek

04Azonosítók

Hivatkozás
2V6.11 (Cytion katalógusszám: 305147)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–5
Ültetési sűrűség
1–3 × 10⁴ sejt/cm²
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
Magzat