
- Chusteczka
- Nerka płodu
- Miejsce przerzutów
- Nie dotyczy (nerka płodu; pochodna linii komórkowej HEK293 o właściwościach nie nowotworowych)
Dokumenty
2V6.11
Cell line · Numer produktu 305147
Komórki 2V6.11 wyhodowano w 2001 roku z ludzkiej embrionalnej linii komórkowej nerki HEK-293. Linia komórkowa 2V6.11 stanowi cenne źródło do badań nad białkiem E4 adenowirusa...
Dostosowanie / Zalecenia
- 2V6.11Cell line€800.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
komórki 2v6.11 zostały uzyskane z ludzkiej embrionalnej linii nerkowej HEK-293 w 2001 roku. Linia komórkowa 2V6.11 jest cennym źródłem do badania onkoproteiny adenowirusowej E4, w szczególności białka E4 34K, o którym wiadomo, że bierze udział w utrzymaniu i naprawie genomu komórkowego. komórki 2V6.11, uzyskane poprzez transfekcję plazmidem pVgRxR, a następnie pEKORF6, powodują indukowaną ekspresję białka E4 34K, co jest związane z hamowaniem mechanizmów komórkowych, które naprawiają podwójne pęknięcia nici DNA. Linia komórkowa 2V6.11 wykazała, że adenowirusowe białka E4 34k i E1b 55k hamują naprawę chromosomalnego DNA poprzez zakłócanie niehomologicznego łączenia końców (NHEJ) i destabilizację białek naprawczych DNA, rozszerzając ich działanie z pozachromosomalnego na komórkowe genomowe DNA.
Indukowalna linia komórkowa 2V6.11, o przylegającej morfologii nabłonka, jest idealna do badania zachowania i cech komórek nabłonkowych pochodzących z nerek, w tym ich odpowiedzi na infekcje ludzkim adenowirusem 40. Ta wszechstronna linia komórkowa, którą można wykryć metodą western blot, umożliwia badaczom zagłębienie się w mechanizmy molekularne, za pomocą których onkoproteina E4 adenowirusa hamuje procesy naprawcze, przyczyniając się w ten sposób do zrozumienia patologii adenowirusa i możliwości opracowania nowych strategii terapeutycznych.
- Chusteczka
- Nerka płodu
- Miejsce przerzutów
- Nie dotyczy (nerka płodu; pochodna linii komórkowej HEK293 o właściwościach nie nowotworowych)
- Zastosowania
- Badania nad onkoproteiną E4 adenowirusa; badania nad naprawą podwójnych pęknięć nici DNA; badania nad szlakiem NHEJ; indukowalne systemy ekspresji białka E4 o masie 34 k; wirusologia; patologia adenowirusa
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO-S1
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 2
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Typ komórki
- Komórki nabłonkowe
04Identyfikatory
- Źródło
- 2V6.11 (numer katalogowy Cytion 305147)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6355
05Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Współczynnik podziału
- od 1 do 5
- Gęstość wysiewu
- od 1 do 3 × 10⁴ komórek/cm²
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
07Darczyńca
- Wiek dawcy
- Płód
08Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak