Gå direkte til indholdet
2V6.11
Væv
Fosterets nyre
Metastasested
Ikke relevant (fosternyre; ikke-tumorigen HEK293-derivat)

Dokumenter

2V6.11

Cell line · Varenummer 305147

2V6.11-cellerne blev isoleret fra den humane embryonale nyrecellelinje HEK-293 i 2001. 2V6.11-cellelinjen er en værdifuld ressource til undersøgelse af det adenovirale E4-protein...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

2v6.11-celler blev afledt af den humane embryonale nyrelinje HEK-293 i 2001. 2V6.11-cellelinjen er en værdifuld ressource til undersøgelse af det adenovirale E4-onkoprotein, især E4 34K-proteinet, der er kendt for at være involveret i vedligeholdelse og reparation af det cellulære genom. 2V6.11-celler, der er fremstillet ved transfektion med plasmidet pVgRxR efterfulgt af pEKORF6, resulterer i et inducerbart udtryk af E4 34K-proteinet, som er forbundet med hæmning af cellulære mekanismer, der reparerer dobbeltstrengsbrud i DNA. 2V6.11-cellelinjen viste, at de adenovirale proteiner E4 34k og E1b 55k hæmmer kromosomal DNA-reparation ved at forstyrre non-homologous end joining (NHEJ) og destabilisere DNA-reparationsproteiner, hvilket udvider deres virkning fra ekstrakromosomalt til cellulært genomisk DNA.

Den inducerbare 2V6.11-cellelinje er med sin adhærente epitelmorfologi ideel til at undersøge adfærd og egenskaber hos epitelceller, der stammer fra nyrerne, herunder deres reaktion på infektioner med human adenovirus 40. Denne alsidige cellelinje, som kan påvises ved western blot, gør det muligt for forskere at dykke ned i de molekylære mekanismer, hvormed adenovirus E4-onkoproteinet hæmmer reparationsprocesser og dermed bidrager til vores forståelse af adenoviruspatologi og potentialet for at udvikle nye terapeutiske strategier.

Væv
Fosterets nyre
Metastasested
Ikke relevant (fosternyre; ikke-tumorigen HEK293-derivat)
Anvendelser
Undersøgelser af adenovirus E4-onkoproteinet; forskning i reparation af dobbeltstrengsbrud i DNA; undersøgelser af NHEJ-vejen; inducerbare E4 34k-ekspressionssystemer; virologi; adenoviruspatologi

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitheliale celler

04Identifikatorer

Kildehenvisning
2V6.11 (Cytion-katalognummer 305147)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
Foster