2V6.11
Cell line · Product number 305147
2v6.11 cells were derived from the human embryonic kidney line HEK-293 in 2001. The 2V6.11 cell line is a valuable resource for studying the adenoviral E4...
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01General information
- Description
2V6.11 細胞係於 2001 年由人類胚胎腎細胞系 HEK-293 衍生而來。2V6.11 細胞系是研究腺病毒 E4 致癌蛋白的寶貴資源，尤其是已知參與細胞基因組維護與修復的 E4 34K 蛋白。 透過先轉染質體 pVgRxR，再轉染 pEKORF6 所獲得的 2V6.11 細胞，可誘導 E4 34K 蛋白的表達，而該蛋白與抑制細胞修復 DNA 雙鏈斷裂的機制有關。 2V6.11 細胞系證實，腺病毒蛋白 E4 34k 和 E1b 55k 會透過干擾非同源末端連接（NHEJ）並使 DNA 修復蛋白不穩定，從而抑制染色體 DNA 的修復，其作用範圍從染色體外 DNA 延伸至細胞基因組 DNA。
2V6.11 誘導型細胞系具有附著性上皮形態，非常適合用於研究源自腎臟的上皮細胞的行為與特性，包括其對人類腺病毒 40 型感染的反應。 這條多功能細胞系可透過 Western blot 檢測，使研究人員能夠深入探究腺病毒 E4 致癌蛋白抑制修復過程的分子機制，從而有助於我們理解腺病毒的病理機制，並為開發新的治療策略提供潛在可能性。
- Tissue
- 胎兒腎臟
- Metastatic site
- 不適用（胎兒腎臟；非致瘤性 HEK293 衍生物）
- Applications
- 腺病毒 E4 致癌蛋白研究；DNA 雙鏈斷裂修復研究；非同源連接（NHEJ）途徑研究；可誘導型 E4 34k 表達系統；病毒學；腺病毒病理學
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Cell type
- 上皮細胞
04Identifiers
- Citation
- 2V6.11（Cytion 型號 305147）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6355
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM（MEM Eagle），含 2 mM L-谷氨醯胺，含 2.2 g/L NaHCO₃，含 EBSS（Cytion 產品編號 820100a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Split ratio
- 1 至 5
- Seeding density
- 1 至 3 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 胎兒
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes