Pereiti prie turinio
2V6.11
Audinys
Vaisiaus inkstai
Metastazių vieta
Netaikoma (vaisiaus inkstas; navikų nesukelianti HEK293 atmaina)

Dokumentai

2V6.11

Cell line · Prekės numeris 305147

2V6.11 ląstelės buvo išskirtos iš žmogaus embrioninių inkstų ląstelių linijos HEK-293 2001 m. 2V6.11 ląstelių linija yra vertingas šaltinis adenoviruso E4 tyrimams...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

2v6.11 ląstelės buvo išvestos iš žmogaus embrioninių inkstų linijos HEK-293 2001 m. 2V6.11 ląstelių linija yra vertingas šaltinis tiriant adenovirusinį E4 onkoproteiną, ypač E4 34K baltymą, kuris, kaip žinoma, dalyvauja ląstelės genomo palaikyme ir taisyme. 2V6.11 ląstelėse, gautose transfekcijos būdu, naudojant plazmidę pVgRxR, po to pEKORF6, indukuojama E4 34K baltymo raiška, kuri yra susijusi su ląstelių mechanizmų, taisančių dvigubos grandinės lūžius DNR, slopinimu. 2V6.11 ląstelių linija parodė, kad adenovirusiniai baltymai E4 34k ir E1b 55k slopina chromosominės DNR taisymą, sutrikdydami nehomologinių galūnių jungimąsi (NHEJ) ir destabilizuodami DNR taisymo baltymus, išplėsdami savo poveikį nuo ekstrachromosominės iki ląstelinės genominės DNR.

2V6.11 indukuojamų ląstelių linija, pasižyminti adherentine epitelio morfologija, idealiai tinka inkstų kilmės epitelio ląstelių elgsenai ir savybėms tirti, įskaitant jų atsaką į žmogaus adenoviruso 40 infekcijas. Ši universali ląstelių linija, kurią galima nustatyti Western blot metodu, leidžia tyrėjams gilintis į molekulinius mechanizmus, kuriais adenoviruso E4 onkoproteinas slopina reparacijos procesus, taip padėdama suprasti adenovirusų patologiją ir galimybes kurti naujas gydymo strategijas.

Audinys
Vaisiaus inkstai
Metastazių vieta
Netaikoma (vaisiaus inkstas; navikų nesukelianti HEK293 atmaina)
Paraiškos
Adenoviruso E4 onkoproteino tyrimai; DNR dvigrandžių lūžių taisymo tyrimai; NHEJ kelio tyrimai; indukuojamos E4 34k ekspresijos sistemos; virusologija; adenoviruso patologija

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Epitelio ląstelės

04Identifikatoriai

Nuoroda
2V6.11 (Cytion katalogo numeris 305147)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–5
Sėjos tankis
nuo 1 iki 3 × 10⁴ ląstelių/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
Vaisius