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2V6.11
ティッシュ
胎児腎臓
転移部位
該当なし(胎児腎臓;非腫瘍性HEK293派生細胞株)

2V6.11

Cell line · 製品番号 305147

2V6.11細胞は、2001年にヒト胚腎細胞株HEK-293から樹立された。2V6.11細胞株は、アデノウイルスE4の研究において貴重な資源である...

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01概要

説明

2v6.11細胞は、2001年にヒト胚性腎臓株HEK-293から派生した。2V6.11細胞株は、アデノウイルスE4オンコプロテイン、特に細胞ゲノムの維持と修復に関与することが知られているE4 34Kタンパク質を研究するための貴重なリソースである。プラスミドpVgRxRとpEKORF6をトランスフェクションして得られた2V6.11細胞は、DNAの二本鎖切断を修復する細胞機構の阻害に関連するE4 34Kタンパク質の誘導性発現をもたらす。2V6.11細胞株は、アデノウイルスタンパク質E4 34kとE1b 55kが非相同末端接合(NHEJ)を阻害し、DNA修復タンパク質を不安定化することによって染色体DNA修復を阻害し、その影響が染色体外から細胞内のゲノムDNAにまで及ぶことを示した。

2V6.11誘導性細胞株は、接着性の上皮形態を有しており、ヒトアデノウイルス40による感染に対する応答を含め、腎臓由来の上皮細胞の挙動や特性を調べるのに理想的である。ウェスタンブロットによる検出が可能なこの万能細胞株は、アデノウイルスE4オンコプロテインが修復過程を阻害する分子メカニズムを解明することを可能にし、アデノウイルスの病理学的理解と新たな治療戦略開発の可能性に貢献する。

ティッシュ
胎児腎臓
転移部位
該当なし(胎児腎臓;非腫瘍性HEK293派生細胞株)
用途
アデノウイルスE4オンコタンパク質に関する研究;DNA二本鎖切断修復に関する研究;NHEJ経路に関する研究;誘導型E4 34k発現系;ウイルス学;アデノウイルス病理学

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
2

03特徴

形態学
上皮様
細胞の種類
上皮細胞

04識別子

引用
2V6.11(Cytion カタログ番号 305147)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_6355

05取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
分割比率
1~5
播種密度
1~3 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

ドナーの年齢
胎児