İçeriğe atla
2V6.11
Doku
Fetal Böbrek
Metastaz yeri
Uygulanamaz (fetal böbrek; tümör oluşturmayan HEK293 türevi)

2V6.11

Cell line · Ürün numarası 305147

2V6.11 hücreleri, 2001 yılında insan embriyonik böbrek hücre hattı HEK-293’ten elde edilmiştir. 2V6.11 hücre hattı, adenoviral E4’ün incelenmesi için değerli bir kaynaktır...

€800.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

2v6.11 hücreleri 2001 yılında insan embriyonik böbrek hattı HEK-293'ten türetilmiştir. 2V6.11 hücre hattı, adenoviral E4 onkoproteinini, özellikle de hücresel genom bakımı ve onarımında rol oynadığı bilinen E4 34K proteinini incelemek için değerli bir kaynaktır. pVgRxR plazmidi ve ardından pEKORF6 ile transfeksiyon yoluyla elde edilen 2V6.11 hücreleri, DNA'daki çift sarmal kırılmalarını onaran hücresel mekanizmaların inhibisyonuyla bağlantılı olan E4 34K proteininin indüklenebilir ekspresyonuyla sonuçlanır. 2V6.11 hücre hattı, adenoviral proteinler E4 34k ve E1b 55k'nın homolog olmayan uç birleştirmeyi (NHEJ) bozarak ve DNA onarım proteinlerini istikrarsızlaştırarak kromozomal DNA onarımını engellediğini ve etkilerini ekstrakromozomalden hücresel genomik DNA'ya kadar genişlettiğini göstermiştir.

Yapışkan epitel morfolojisine sahip 2V6.11 indüklenebilir hücre hattı, insan adenovirüs 40 enfeksiyonlarına verdikleri yanıt da dahil olmak üzere böbrek kaynaklı epitel hücrelerinin davranış ve özelliklerini araştırmak için idealdir. Western blot ile tespit edilebilen bu çok yönlü hücre hattı, araştırmacıların adenovirüs E4 onkoproteininin onarım süreçlerini inhibe ettiği moleküler mekanizmaları araştırmasına olanak tanıyarak adenovirüs patolojisini anlamamıza ve yeni terapötik stratejiler geliştirme potansiyeline katkıda bulunur.

Doku
Fetal Böbrek
Metastaz yeri
Uygulanamaz (fetal böbrek; tümör oluşturmayan HEK293 türevi)
Uygulamalar
Adenovirüs E4 onkoprotein çalışmaları; DNA çift sarmal kırığı onarımı araştırmaları; NHEJ yolu çalışmaları; indüklenebilir E4 34k ekspresyon sistemleri; viroloji; adenovirüs patolojisi

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Epitel hücreleri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
2V6.11 (Cytion katalog numarası 305147)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 5'e kadar
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 × 10⁴ hücre/cm²
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
Fetüs