Siirry sisältöön
2V6.11
Kudos
Sikiön munuaiset
Metastaasikohde
Ei sovelleta (sikiön munuainen; ei-kasvainta aiheuttava HEK293-johdannainen)

Asiakirjat

2V6.11

Cell line · Tuotenumero 305147

2V6.11-solut johdettiin ihmisen alkion munuaisista peräisin olevasta HEK-293-solulinjasta vuonna 2001. 2V6.11-solulinja on arvokas resurssi adenoviruksen E4-proteiinin tutkimuksessa...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

2v6.11-solut johdettiin ihmisen alkion munuaislinjasta HEK-293 vuonna 2001. 2V6.11-solulinja on arvokas resurssi adenoviruksen E4-onkoproteiinin tutkimiseen, erityisesti E4 34K -proteiinin, jonka tiedetään osallistuvan solujen genomin ylläpitoon ja korjaamiseen. 2V6.11-solut, jotka on saatu transfektoimalla plasmidilla pVgRxR ja sen jälkeen pEKORF6, johtavat E4 34K -proteiinin indusoituvaan ilmentymiseen, joka liittyy DNA:n kaksoissäiekatkoksia korjaavien solumekanismien estämiseen. Solulinja 2V6.11 osoitti, että adenovirusproteiinit E4 34k ja E1b 55k estävät kromosomaalisen DNA:n korjausta häiritsemällä ei-homologista loppuliitosta (NHEJ) ja destabiloimalla DNA:n korjausproteiineja, jolloin niiden vaikutus ulottuu ekstrakromosomaalisesta DNA:sta solun genomiseen DNA:han.

2V6.11-indusoituva solulinja, jonka epiteelin morfologia on tarttuva, sopii erinomaisesti munuaisperäisten epiteelisolujen käyttäytymisen ja ominaisuuksien tutkimiseen, mukaan lukien niiden vaste ihmisen adenovirus 40:n aiheuttamiin infektioihin. Tämä monipuolinen solulinja, joka voidaan havaita western blot -menetelmällä, antaa tutkijoille mahdollisuuden tutkia molekyylimekanismeja, joiden avulla adenovirus E4-onkoproteiini estää korjausprosesseja, ja edistää siten adenoviruspatologian ymmärtämistä ja uusien terapeuttisten strategioiden kehittämismahdollisuuksia.

Kudos
Sikiön munuaiset
Metastaasikohde
Ei sovelleta (sikiön munuainen; ei-kasvainta aiheuttava HEK293-johdannainen)
Sovellukset
Adenoviruksen E4-onkoproteiinin tutkimukset; DNA:n kaksoisjuostekatkosten korjautumista koskeva tutkimus; NHEJ-reitin tutkimukset; indusoituvat E4 34k -ilmentymisjärjestelmät; virologia; adenoviruksen patologia

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolut

04Tunnisteet

Lähdeviite
2V6.11 (Cytion-tuotenumero 305147)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴ solua/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Sikiö