Langsung ke isi
2V6.11
Tisu
Ginjal Janin
Lokasi metastasis
Tidak berlaku (ginjal janin; turunan sel HEK293 yang tidak bersifat tumorigenik)

2V6.11

Cell line · Nomor produk 305147

Sel 2V6.11 diisolasi dari garis sel ginjal embrio manusia HEK-293 pada tahun 2001. Garis sel 2V6.11 merupakan sumber daya yang berharga untuk mempelajari protein E4 adenovirus...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

sel 2V6.11 berasal dari garis ginjal embrionik manusia HEK-293 pada tahun 2001. Garis sel 2V6.11 adalah sumber daya yang berharga untuk mempelajari onkoprotein E4 adenoviral, khususnya protein E4 34K yang diketahui terlibat dalam pemeliharaan dan perbaikan genom seluler. sel 2V6.11, yang diperoleh melalui transfeksi dengan plasmid pVgRxR yang diikuti oleh pEKORF6, menghasilkan ekspresi protein E4 34K yang dapat diinduksi, yang terkait dengan penghambatan mekanisme seluler yang memperbaiki pemutusan untai ganda pada DNA. Garis sel 2V6.11 menunjukkan bahwa protein adenoviral E4 34k dan E1b 55k menghambat perbaikan DNA kromosom dengan mengganggu penggabungan ujung non-homolog (NHEJ) dan mengacaukan protein perbaikan DNA, memperluas efeknya dari ekstrakromosom ke DNA genom seluler.

Garis sel 2V6.11 yang dapat diinduksi, dengan morfologi epitel yang melekat, sangat ideal untuk menyelidiki perilaku dan karakteristik sel epitel yang berasal dari ginjal, termasuk responsnya terhadap infeksi oleh human adenovirus 40. Garis sel serbaguna ini, yang dapat dideteksi dengan western blot, memungkinkan para peneliti untuk mempelajari mekanisme molekuler di mana onkoprotein E4 adenovirus menghambat proses perbaikan, sehingga berkontribusi pada pemahaman kita tentang patologi adenovirus dan potensi untuk mengembangkan strategi terapeutik baru.

Tisu
Ginjal Janin
Lokasi metastasis
Tidak berlaku (ginjal janin; turunan sel HEK293 yang tidak bersifat tumorigenik)
Aplikasi
Penelitian mengenai onkoprotein E4 adenovirus; penelitian mengenai perbaikan patahan untai ganda DNA; penelitian mengenai jalur NHEJ; sistem ekspresi E4 34k yang dapat diinduksi; virologi; patologi adenovirus

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
2

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Jenis sel
Sel epitel

04Pengidentifikasi

Referensi
2V6.11 (Nomor katalog Cytion 305147)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Penanganan dan budidaya

Media kultur
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Rasio pemisahan
1 sampai 5
Kepadatan penanaman
1 hingga 3 × 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

07Donatur

Usia donor
Janin