Skip to content
2V6.11
Tissue
ไตของทารกในครรภ์
Metastatic site
ไม่เกี่ยวข้อง (ไตของทารกในครรภ์; สายพันธุ์ HEK293 ที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก)

Documents

2V6.11

Cell line · Product number 305147

2v6.11 cells were derived from the human embryonic kidney line HEK-293 in 2001. The 2V6.11 cell line is a valuable resource for studying the adenoviral E4...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ 2v6.11 ถูกแยกมาจากสายพันธุ์ไตของทารกในครรภ์มนุษย์ HEK-293 ในปี 2001 สายพันธุ์เซลล์ 2V6.11 เป็นทรัพยากรที่มีค่าสำหรับการศึกษาโปรตีนก่อมะเร็ง E4 ของอะดีโนไวรัส โดยเฉพาะโปรตีน E4 34K ที่ทราบว่ามีบทบาทในการรักษาและซ่อมแซมจีโนมของเซลล์เซลล์ 2V6.11 ซึ่งได้มาจากการถ่ายโอนพลาสมิด pVgRxR ตามด้วย pEKORF6 ส่งผลให้เกิดการแสดงออกของโปรตีน E4 34K ที่สามารถกระตุ้นได้ ซึ่งเชื่อมโยงกับการยับยั้งกลไกของเซลล์ที่ซ่อมแซมการแตกของสายคู่ในดีเอ็นเอเซลล์ไลน์ 2V6.11 แสดงให้เห็นว่าโปรตีนอะดีโนไวรัส E4 34k และ E1b 55k ยับยั้งการซ่อมแซมดีเอ็นเอโครโมโซมโดยการรบกวนการเชื่อมต่อปลายดีเอ็นเอที่ไม่เหมือนกัน (NHEJ) และทำให้โปรตีนซ่อมแซมดีเอ็นเอไม่เสถียร ส่งผลให้ผลกระทบขยายจากดีเอ็นเอที่อยู่นอกโครโมโซมไปสู่ดีเอ็นเอในจีโนมของเซลล์

เซลล์ไลน์ 2V6.11 ที่สามารถเหนี่ยวนำได้ พร้อมด้วยลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวที่เกาะติด เป็นเซลล์ที่เหมาะสมอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาพฤติกรรมและลักษณะเฉพาะของเซลล์เยื่อบุผิวที่มาจากไต รวมถึงการตอบสนองต่อการติดเชื้ออะดีโนไวรัสในมนุษย์ชนิดที่ 40เซลล์ไลน์อเนกประสงค์นี้สามารถตรวจพบได้ด้วยการทดสอบเวสเทิร์นบลอต ช่วยให้นักวิจัยสามารถศึกษาเชิงลึกถึงกลไกระดับโมเลกุลที่โปรตีน E4 oncoprotein ของอะดีโนไวรัสยับยั้งกระบวนการซ่อมแซม ซึ่งเป็นการเพิ่มพูนความเข้าใจของเราเกี่ยวกับพยาธิสภาพของอะดีโนไวรัสและศักยภาพในการพัฒนาวิธีการรักษาใหม่ๆ

Tissue
ไตของทารกในครรภ์
Metastatic site
ไม่เกี่ยวข้อง (ไตของทารกในครรภ์; สายพันธุ์ HEK293 ที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอก)
Applications
การศึกษาโปรตีนก่อมะเร็งของอะดีโนไวรัส E4; การวิจัยการซ่อมแซมการแตกของสายดีเอ็นเอคู่; การศึกษาเส้นทาง NHEJ; ระบบการแสดงออกของ E4 34k ที่สามารถเหนี่ยวนำได้; ไวรัสวิทยา; พยาธิสภาพของอะดีโนไวรัส

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
2V6.11 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305147)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
1 ถึง 3 × 10⁴ เซลล์/ตารางเซนติเมตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
ทารกในครรภ์