Skip to content
2V6.11
Tissue
Thận thai nhi
Metastatic site
Không áp dụng (thận thai nhi; dòng tế bào HEK293 không gây ung thư)

Documents

2V6.11

Cell line · Product number 305147

2v6.11 cells were derived from the human embryonic kidney line HEK-293 in 2001. The 2V6.11 cell line is a valuable resource for studying the adenoviral E4...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

tế bào 2v6.11 được phân lập từ dòng tế bào thận phôi người HEK-293 vào năm 2001. Dòng tế bào 2V6.11 là một nguồn tài nguyên quý giá để nghiên cứu protein ung thư E4 của adenovirus, đặc biệt là protein E4 34K được biết đến là có vai trò trong việc duy trì và sửa chữa bộ gen tế bào. các tế bào 2V6.11, được tạo ra thông qua quá trình chuyển gen bằng plasmid pVgRxR tiếp theo là pEKORF6, dẫn đến sự biểu hiện có điều kiện của protein E4 34K, liên quan đến ức chế các cơ chế tế bào sửa chữa vết gãy hai sợi DNA. Dòng tế bào 2V6.11 đã chứng minh rằng các protein adenovirus E4 34k và E1b 55k ức chế sửa chữa DNA nhiễm sắc thể bằng cách làm gián đoạn quá trình nối đầu không đồng nhất (NHEJ) và làm mất ổn định các protein sửa chữa DNA, mở rộng tác động của chúng từ DNA ngoại nhiễm sắc thể sang DNA gen của tế bào.

Dòng tế bào 2V6.11 có khả năng kích hoạt, với hình thái biểu mô bám dính, là lựa chọn lý tưởng để nghiên cứu hành vi và đặc điểm của tế bào biểu mô có nguồn gốc từ thận, bao gồm phản ứng của chúng đối với nhiễm trùng do adenovirus 40 ở người. Dòng tế bào đa năng này, có thể được phát hiện bằng phương pháp western blot, cho phép các nhà nghiên cứu khám phá các cơ chế phân tử mà protein ung thư E4 của adenovirus ức chế các quá trình sửa chữa, từ đó góp phần vào sự hiểu biết về bệnh lý của adenovirus và tiềm năng phát triển các chiến lược điều trị mới.

Tissue
Thận thai nhi
Metastatic site
Không áp dụng (thận thai nhi; dòng tế bào HEK293 không gây ung thư)
Applications
Các nghiên cứu về protein gây ung thư E4 của adenovirus; nghiên cứu về cơ chế sửa chữa đứt gãy chuỗi kép DNA; các nghiên cứu về con đường NHEJ; các hệ thống biểu hiện E4 34k có thể kích hoạt; virus học; bệnh lý do adenovirus gây ra

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Cell type
Tế bào biểu mô

04Identifiers

Citation
2V6.11 (Mã sản phẩm Cytion 305147)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Split ratio
1 đến 5
Seeding density
1 đến 3 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
Thai nhi