Preskoči na vsebino
2V6.11
Tkivo
Plodove ledvice
Mesto metastaze
Ni relevantno (plodova ledvica; netumorigenični derivat celic HEK293)

Dokumenti

2V6.11

Cell line · Številka izdelka 305147

Celice 2V6.11 so bile leta 2001 izolirane iz človeške embrionalne ledvične celične linije HEK-293. Celična linija 2V6.11 je dragocen vir za preučevanje adenovirusnega proteina E4...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

celice 2v6.11 so bile leta 2001 pridobljene iz linije človeških embrionalnih ledvic HEK-293. Celična linija 2V6.11 je dragocen vir za preučevanje adenovirusnega onkoproteina E4, zlasti proteina E4 34K, za katerega je znano, da sodeluje pri vzdrževanju in popravljanju celičnega genoma. celice 2V6.11, pridobljene s transfekcijo s plazmidom pVgRxR, ki mu sledi pEKORF6, povzročajo inducirano izražanje beljakovine E4 34K, kar je povezano z zaviranjem celičnih mehanizmov, ki popravljajo dvojne prekinitve verig v DNK. Celična linija 2V6.11 je pokazala, da adenovirusna proteina E4 34k in E1b 55k zavirata popravljanje kromosomske DNK z motenjem nehomolognega končnega spajanja (NHEJ) in destabilizacijo proteinov za popravljanje DNK, s čimer se njun učinek razširi z zunajkromosomske na celično genomsko DNK.

Inducibilne celične linije 2V6.11 so s svojo adherentno epitelijsko morfologijo idealne za raziskovanje obnašanja in značilnosti epitelijskih celic, pridobljenih iz ledvic, vključno z njihovim odzivom na okužbe s človeškim adenovirusom 40. Ta vsestranska celična linija, ki jo je mogoče zaznati z Western blotom, omogoča raziskovalcem, da se poglobijo v molekularne mehanizme, s katerimi adenovirusni onkoprotein E4 zavira procese popravljanja, ter tako prispeva k razumevanju patologije adenovirusov in možnosti razvoja novih terapevtskih strategij.

Tkivo
Plodove ledvice
Mesto metastaze
Ni relevantno (plodova ledvica; netumorigenični derivat celic HEK293)
Uporaba
Raziskave onkoproteina E4 adenovirusa; raziskave popravljanja pretrganj dvojnovijačne DNK; raziskave poti NHEJ; sistemi za inducibilno izražanje E4 34k; virologija; patologija adenovirusa

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Epitelijske celice

04Identifikatorji

Navajanje vira
2V6.11 (kataloška številka Cytion 305147)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 5
Gostota setve
1 do 3 × 10⁴ celic/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
Plod