Prejsť na obsah
2V6.11
Tkanivo
Fetálne obličky
Miesto metastáz
Neplatí (plodová oblička; netumorogénny derivát buniek HEK293)

Dokumenty

2V6.11

Cell line · Číslo výrobku 305147

Bunky 2V6.11 boli izolované z ľudskej embryonálnej obličkovej bunky HEK-293 v roku 2001. Bunky 2V6.11 predstavujú cenný zdroj pre štúdium adenovírusového proteínu E4...

€800.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

bunky 2v6.11 boli odvodené z línie ľudských embryonálnych obličiek HEK-293 v roku 2001. Bunková línia 2V6.11 je cenným zdrojom na štúdium adenovírusového onkoproteínu E4, najmä proteínu E4 34K, o ktorom je známe, že sa podieľa na údržbe a oprave bunkového genómu. bunky 2V6.11 získané transfekciou plazmidom pVgRxR a následnou transfekciou plazmidom pEKORF6 vedú k indukovateľnej expresii proteínu E4 34K, ktorý je spojený s inhibíciou bunkových mechanizmov, ktoré opravujú dvojvláknové zlomy v DNA. Bunková línia 2V6.11 preukázala, že adenovírusové proteíny E4 34k a E1b 55k inhibujú opravu chromozomálnej DNA narušením nehomologického spájania koncov (NHEJ) a destabilizáciou opravných proteínov DNA, čím sa ich účinok rozširuje z extrachromozomálnej na bunkovú genomickú DNA.

Indukovateľné bunkové línie 2V6.11 s ich adherentnou epitelovou morfológiou sú ideálne na skúmanie správania a vlastností epitelových buniek odvodených od obličiek vrátane ich reakcie na infekcie ľudským adenovírusom 40. Táto univerzálna bunková línia, ktorú možno detegovať pomocou western blotu, umožňuje výskumníkom preniknúť do molekulárnych mechanizmov, ktorými onkoproteín adenovírusu E4 inhibuje reparačné procesy, čím prispieva k nášmu pochopeniu patológie adenovírusov a potenciálu vývoja nových terapeutických stratégií.

Tkanivo
Fetálne obličky
Miesto metastáz
Neplatí (plodová oblička; netumorogénny derivát buniek HEK293)
Aplikácie
Štúdie onkoproteínu E4 adenovírusu; výskum opravy zlomenín dvojreťazcovej DNA; štúdie dráhy NHEJ; systémy indukovateľnej expresie E4 34k; virológia; patológia adenovírusu

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epitelové bunky

04Identifikátory

Citácia
2V6.11 (katalógové číslo Cytion 305147)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Pomer rozdelenia
1 až 5
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buniek/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
Plod