Gå til innholdet
2V6.11
Vev
Fosterets nyre
Metastaseområde
Ikke relevant (fosternyre; ikke-tumorinduserende HEK293-derivat)

Dokumenter

2V6.11

Cell line · Produktnummer 305147

2V6.11-cellene ble isolert fra den humane embryonale nyrecellelinjen HEK-293 i 2001. 2V6.11-cellelinjen er en verdifull ressurs for studier av det adenovirale E4-proteinet...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

2v6.11-celler ble avledet fra den humane embryonale nyrelinjen HEK-293 i 2001. 2V6.11-cellelinjen er en verdifull ressurs for studier av det adenovirale E4-onkoproteinet, særlig E4 34K-proteinet, som er kjent for å være involvert i vedlikehold og reparasjon av genomet i celler. 2V6.11-celler, som er fremstilt ved transfeksjon med plasmidet pVgRxR etterfulgt av pEKORF6, resulterer i induserbart uttrykk av E4 34K-proteinet, som er knyttet til hemming av cellulære mekanismer som reparerer dobbeltstrengbrudd i DNA. 2V6.11-cellelinjen viste at de adenovirale proteinene E4 34k og E1b 55k hemmer kromosomal DNA-reparasjon ved å forstyrre non-homologous end joining (NHEJ) og destabilisere DNA-reparasjonsproteiner, slik at effekten utvides fra ekstrakromosomalt til cellulært genomisk DNA.

Den induserbare cellelinjen 2V6.11, med sin adherente epitelmorfologi, er ideell for å undersøke oppførselen og egenskapene til epitelceller som stammer fra nyrene, inkludert deres respons på infeksjoner med humant adenovirus 40. Denne allsidige cellelinjen, som kan detekteres ved hjelp av western blot, gjør det mulig for forskere å se nærmere på de molekylære mekanismene som gjør at adenovirus E4-onkoproteinet hemmer reparasjonsprosesser, og bidrar dermed til vår forståelse av adenoviruspatologi og potensialet for å utvikle nye terapeutiske strategier.

Vev
Fosterets nyre
Metastaseområde
Ikke relevant (fosternyre; ikke-tumorinduserende HEK293-derivat)
Søknader
Studier av adenovirus E4-onkoprotein; forskning på reparasjon av dobbeltstrengsbrudd i DNA; studier av NHEJ-veien; inducerbare E4 34k-ekspresjonssystemer; virologi; adenoviruspatologi

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelceller

04Identifikatorer

Kildehenvisning
2V6.11 (Cytion-katalognummer 305147)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 5
Såtetthet
1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
Foster