
- Тъкан
- Фетален бъбрек
- Място на метастазите
- Неприложимо (фетален бъбрек; нетуморогенно производно на HEK293)
Документи
2V6.11
Cell line · Номер на продукта 305147
Клетките 2V6.11 са получени от човешката ембрионална бъбречна клетъчна линия HEK-293 през 2001 г. Клетъчната линия 2V6.11 е ценен ресурс за изследване на аденовирусния E4...
Персонализиране / Препоръки
- 2V6.11Cell line€800.00
Препоръчани (най-новата партида)
01Обща информация
- Описание
клетките 2v6.11 са получени от човешката ембрионална бъбречна линия HEK-293 през 2001 г. Клетъчната линия 2V6.11 е ценен ресурс за изучаване на аденовирусния онкопротеин Е4, особено на протеина Е4 34K, за който е известно, че участва в поддържането и възстановяването на клетъчния геном. клетките 2V6.11, получени чрез трансфекция с плазмид pVgRxR, последван от pEKORF6, водят до индуцируема експресия на протеина E4 34K, която е свързана с инхибиране на клетъчните механизми, които поправят двойните верижни прекъсвания в ДНК. Клетъчната линия 2V6.11 демонстрира, че аденовирусните протеини E4 34k и E1b 55k инхибират хромозомната ДНК репарация, като нарушават нехомоложното свързване на краищата (NHEJ) и дестабилизират ДНК репарационните протеини, разширявайки ефекта си от екстрахромозомната към клетъчната геномна ДНК.
Индуцируемата клетъчна линия 2V6.11, с нейната адхезивна епителна морфология, е идеална за изследване на поведението и характеристиките на епителните клетки, получени от бъбреците, включително отговора им към инфекции с човешки аденовирус 40. Тази универсална клетъчна линия, която може да бъде открита чрез Western blot, дава възможност на изследователите да вникнат в молекулярните механизми, чрез които аденовирусният Е4 онкопротеин потиска възстановителните процеси, като по този начин допринася за разбирането ни на аденовирусната патология и потенциала за разработване на нови терапевтични стратегии.
- Тъкан
- Фетален бъбрек
- Място на метастазите
- Неприложимо (фетален бъбрек; нетуморогенно производно на HEK293)
- Приложения
- Изследвания на онкопротеина E4 на аденовируса; изследвания върху репарацията на двойноверижни разкъсвания на ДНК; изследвания на NHEJ пътя; системи за индуцируема експресия на E4 34k; вирусология; патология на аденовируса
02Класификация
- Организъм
- Човек
- Секс
- Женски
- Свойства, свързани с растежа
- Привърженик
- Статус на ГМО
- GMO-S1
- Подробности относно статуса на ГМО
- GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Ниво на биологична безопасност
- 2
03Характеристики
- Морфология
- Подобни на епител
- Тип клетка
- Епителни клетки
04Идентификатори
- Източник
- 2V6.11 (каталожен номер на Cytion 305147)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 9606
- Целозавър
- CVCL_6355
05Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
- Атмосфера за инкубация
37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.
- Добавки
- Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
- Реагент за дисоциация
- Accutase
- Пресаждане
- Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
- Коефициент на разделяне
- от 1 до 5
- Плътност на засяването
- от 1 до 3 × 10⁴ клетки/см²
- Обновяване на течността
- 2 до 3 пъти седмично
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
07Дарител
- Възраст на донора
- Плод
08Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Необходимо е споразумение за прехвърляне на материали
- Да