Премини към съдържанието
2V6.11
Тъкан
Фетален бъбрек
Място на метастазите
Неприложимо (фетален бъбрек; нетуморогенно производно на HEK293)

Документи

2V6.11

Cell line · Номер на продукта 305147

Клетките 2V6.11 са получени от човешката ембрионална бъбречна клетъчна линия HEK-293 през 2001 г. Клетъчната линия 2V6.11 е ценен ресурс за изследване на аденовирусния E4...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

клетките 2v6.11 са получени от човешката ембрионална бъбречна линия HEK-293 през 2001 г. Клетъчната линия 2V6.11 е ценен ресурс за изучаване на аденовирусния онкопротеин Е4, особено на протеина Е4 34K, за който е известно, че участва в поддържането и възстановяването на клетъчния геном. клетките 2V6.11, получени чрез трансфекция с плазмид pVgRxR, последван от pEKORF6, водят до индуцируема експресия на протеина E4 34K, която е свързана с инхибиране на клетъчните механизми, които поправят двойните верижни прекъсвания в ДНК. Клетъчната линия 2V6.11 демонстрира, че аденовирусните протеини E4 34k и E1b 55k инхибират хромозомната ДНК репарация, като нарушават нехомоложното свързване на краищата (NHEJ) и дестабилизират ДНК репарационните протеини, разширявайки ефекта си от екстрахромозомната към клетъчната геномна ДНК.

Индуцируемата клетъчна линия 2V6.11, с нейната адхезивна епителна морфология, е идеална за изследване на поведението и характеристиките на епителните клетки, получени от бъбреците, включително отговора им към инфекции с човешки аденовирус 40. Тази универсална клетъчна линия, която може да бъде открита чрез Western blot, дава възможност на изследователите да вникнат в молекулярните механизми, чрез които аденовирусният Е4 онкопротеин потиска възстановителните процеси, като по този начин допринася за разбирането ни на аденовирусната патология и потенциала за разработване на нови терапевтични стратегии.

Тъкан
Фетален бъбрек
Място на метастазите
Неприложимо (фетален бъбрек; нетуморогенно производно на HEK293)
Приложения
Изследвания на онкопротеина E4 на аденовируса; изследвания върху репарацията на двойноверижни разкъсвания на ДНК; изследвания на NHEJ пътя; системи за индуцируема експресия на E4 34k; вирусология; патология на аденовируса

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
2

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителни клетки

04Идентификатори

Източник
2V6.11 (каталожен номер на Cytion 305147)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_6355

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 5
Плътност на засяването
от 1 до 3 × 10⁴ клетки/см²
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
Плод