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2V6.11
Pañuelo de papel
Riñón fetal
Lugar de metástasis
No aplicable (riñón fetal; derivado de HEK293 no tumorigénico)

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2V6.11

Cell line · Número de producto 305147

Las células 2V6.11 se obtuvieron a partir de la línea celular renal embrionaria humana HEK-293 en 2001. La línea celular 2V6.11 es un recurso valioso para el estudio de la proteína E4 del adenovirus...

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01Información general

Descripción

las células 2v6.11 se derivaron de la línea de riñón embrionario humano HEK-293 en 2001. La línea celular 2V6.11 es un recurso valioso para estudiar la oncoproteína adenoviral E4, en particular la proteína E4 34K, de la que se sabe que interviene en el mantenimiento y la reparación del genoma celular. las células 2V6.11, obtenidas mediante transfección con el plásmido pVgRxR seguido de pEKORF6, dan lugar a la expresión inducible de la proteína E4 34K, que está relacionada con la inhibición de los mecanismos celulares que reparan las roturas de doble cadena en el ADN. La línea celular 2V6.11 demostró que las proteínas adenovirales E4 34k y E1b 55k inhiben la reparación del ADN cromosómico al interrumpir la unión de extremos no homólogos (NHEJ) y desestabilizar las proteínas de reparación del ADN, extendiendo su efecto del ADN genómico extracromosómico al celular.

La línea celular inducible 2V6.11, con su morfología epitelial adherente, es ideal para investigar el comportamiento y las características de las células epiteliales derivadas del riñón, incluida su respuesta a las infecciones por el adenovirus humano 40. Esta versátil línea celular, que puede detectarse mediante western blot, permite a los investigadores profundizar en los mecanismos moleculares por los que la oncoproteína E4 del adenovirus inhibe los procesos de reparación, contribuyendo así a nuestra comprensión de la patología del adenovirus y al potencial desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas.

Pañuelo de papel
Riñón fetal
Lugar de metástasis
No aplicable (riñón fetal; derivado de HEK293 no tumorigénico)
Aplicaciones
Estudios sobre la oncoproteína E4 del adenovirus; investigación sobre la reparación de roturas de doble cadena en el ADN; estudios sobre la vía NHEJ; sistemas de expresión inducible de la E4 de 34 k; virología; patología del adenovirus

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliales

04Identificadores

Referencia
2V6.11 (número de catálogo 305147 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Relación de división
Del 1 al 5
Densidad de siembra
De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
Feto