2V6.11

Las células 2V6.11 se derivaron de la línea celular renal embrionaria humana HEK-293 en 2001. La línea celular 2V6.11 es un recurso valioso para estudiar la oncoproteína E4 del adenovirus, en particular la proteína E4 34K, de la que se sabe que participa en el mantenimiento y la reparación del genoma celular. Las células 2V6.11, obtenidas mediante transfección con el plásmido pVgRxR seguido del pEKORF6, dan lugar a la expresión inducible de la proteína E4 34K, la cual está relacionada con la inhibición de los mecanismos celulares que reparan las roturas de doble cadena en el ADN. La línea celular 2V6.11 demostró que las proteínas adenovirales E4 34k y E1b 55k inhiben la reparación del ADN cromosómico al interrumpir la unión de extremos no homólogos (NHEJ) y desestabilizar las proteínas de reparación del ADN, extendiendo su efecto del ADN extracromosómico al ADN genómico celular.

La línea celular inducible 2V6.11, con su morfología epitelial adherente, es ideal para investigar el comportamiento y las características de las células epiteliales derivadas del riñón, incluida su respuesta a las infecciones por el adenovirus humano 40. Esta versátil línea celular, que puede detectarse mediante western blot, permite a los investigadores profundizar en los mecanismos moleculares mediante los cuales la oncoproteína E4 del adenovirus inhibe los procesos de reparación, contribuyendo así a nuestra comprensión de la patología del adenovirus y al potencial para desarrollar nuevas estrategias terapéuticas.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.