Přejít na obsah
2V6.11
Tkáň
Fetální ledvina
Místo metastázy
Nevztahuje se (plodová ledvina; netumorogenní derivát buněk HEK293)

Dokumenty

2V6.11

Cell line · Číslo výrobku 305147

Buňky 2V6.11 byly odvozeny z lidské embryonální ledvinové buněčné linie HEK-293 v roce 2001. Buněčná linie 2V6.11 představuje cenný zdroj pro studium adenovirového proteinu E4...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

buňky 2v6.11 byly odvozeny z linie lidských embryonálních ledvin HEK-293 v roce 2001. Buněčná linie 2V6.11 je cenným zdrojem pro studium adenovirového onkoproteinu E4, zejména proteinu E4 34K, o němž je známo, že se podílí na údržbě a opravě buněčného genomu. buňky 2V6.11, získané transfekcí plazmidem pVgRxR a následně pEKORF6, mají za následek indukovatelnou expresi proteinu E4 34K, která je spojena s inhibicí buněčných mechanismů opravujících dvouřetězcové zlomy v DNA. Buněčná linie 2V6.11 prokázala, že adenovirové proteiny E4 34k a E1b 55k inhibují opravu chromozomální DNA narušením nehomologního spojování konců (NHEJ) a destabilizací opravných proteinů DNA, čímž se jejich účinek rozšiřuje z extrachromozomální na buněčnou genomickou DNA.

Indukovatelná buněčná linie 2V6.11 s adherentní epiteliální morfologií je ideální pro zkoumání chování a vlastností epiteliálních buněk odvozených od ledvin, včetně jejich reakce na infekce lidským adenovirem 40. Tato univerzální buněčná linie, kterou lze detekovat pomocí Western blotu, umožňuje výzkumníkům proniknout do molekulárních mechanismů, kterými onkoprotein adenoviru E4 inhibuje reparační procesy, a přispět tak k pochopení patologie adenovirů a potenciálu pro vývoj nových terapeutických strategií.

Tkáň
Fetální ledvina
Místo metastázy
Nevztahuje se (plodová ledvina; netumorogenní derivát buněk HEK293)
Aplikace
Studie onkoproteinu E4 adenoviru; výzkum opravy dvojřetězcových zlomů DNA; studie dráhy NHEJ; systémy indukovatelné exprese E4 34k; virologie; patologie adenoviru

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This HEK293-derived line contains an adenovirus 5 E4-34k expression construct controlled by an ecdysone-inducible promoter, enabling regulated E4 protein production. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelové buňky

04Identifikátory

Citace
2V6.11 (katalogové číslo Cytion 305147)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6355

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 5
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buněk/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
Plod