Pereiti prie turinio
L929-GFP
Audinys
Jungiamasis audinys
Sinonimai
L929/GL50

Dokumentai

L929-GFP

Cell line · Prekės numeris 305956

L-929-GFP ląstelės yra fluorescenciniu žymekliu pažymėtas pelių L-929 fibroblastų ląstelių linijos variantas, kuris iš pradžių buvo išskirtas iš poodinio jungiamojo audinio...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

L-929-GFP ląstelės yra fluorescenciniu žymekliu pažymėtas pelių L-929 fibroblastų ląstelių linijos variantas, kuris iš pradžių buvo išskirtas iš suaugusios pelės poodinio jungiamojo audinio. Pirminė L-929 linija yra viena iš plačiausiai naudojamų pelių fibroblastų modelių biomedicininiuose tyrimuose ir pasižymi adhezyviniu augimu, verpstės formos morfologija bei stipriu proliferacijos pajėgumu. L-929 ląstelės plačiai naudojamos citotoksiškumo, uždegimo, ekstraląstelinio matrikso biologijos ir šeimininko bei patogeno sąveikos tyrimuose, taip pat jos dažnai naudojamos tokių citokinų kaip naviko nekrozės faktorius-α (TNF-α) gamybai ir biologiniams tyrimams.

Stabili žaliosios fluorescencijos baltymo (GFP) ekspresija L-929-GFP ląstelėse leidžia tiesiogiai stebėti ir kiekybiškai vertinti fibroblastų elgseną realiuoju laiku. Šios ląstelės ypač naudingos fluorescencijos pagrįstose taikymose, įskaitant migracijos tyrimus, bendros kultūros eksperimentus, audinių inžinerijos tyrimus ir gyvų ląstelių vaizdavimą. L-929-GFP ląstelės išlaiko pagrindines biologines tėvinės fibroblastų linijos savybes, tuo pačiu suteikdamos didesnį praktiškumą stebint ląstelių lokalizaciją, proliferaciją ir sąveikas sudėtingose ląstelinėse aplinkose. Todėl jos tarnauja kaip universalus modelis, skirtas stromos ląstelių dinamikos, žaizdų gijimo procesų, biomedžiagų suderinamumo ir imuninės sistemos mediuojamų citotoksinių reakcijų tyrimams.

Genetinė modifikacija: stabiliai modifikuotos replikacijos nesugebančiu lentivirusiniu transdukavimu, kad ekspresuotų „ZsGreen1“ žalios fluorescencijos baltymo reporterį; išlaikomos kaip polikloninė populiacija, atrinkta puromicinu (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 saugumo lygis.

Audinys
Jungiamasis audinys
Sinonimai
  • L929/GL50

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Ląstelių tipas
Fibroblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
L929-GFP (Cytion katalogo numeris 305956)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
ZsGreen1 (žaliasis fluorescuojantis baltymas)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1–3 x 104 ląstelės/cm2
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
100 dienų