İçeriğe atla
L929-GFP
Doku
Bağ dokusu
Eş anlamlılar
L929/GL50

L929-GFP

Cell line · Ürün numarası 305956

L-929-GFP hücreleri, başlangıçta deri altı bağ dokusundan elde edilen fare L-929 fibroblast hücre hattının floresanla işaretlenmiş bir türevidir...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

L-929-GFP hücreleri, başlangıçta yetişkin bir farenin deri altı bağ dokusundan elde edilen fare L-929 fibroblast hücre hattının floresanla işaretlenmiş bir türevidir. Ana L-929 hattı, biyomedikal araştırmalarda en yaygın olarak kullanılan fare fibroblast modellerinden biridir ve yapışkan büyümesi, iğ şeklindeki morfolojisi ve güçlü proliferatif kapasitesiyle karakterize edilir. L-929 hücreleri, sitotoksisite, inflamasyon, hücre dışı matris biyolojisi ve konak-patojen etkileşimleri üzerine yapılan çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır; ayrıca tümör nekroz faktörü-α (TNF-α) gibi sitokinlerin üretimi ve biyolojik testlerinde de sıklıkla kullanılmaktadır.

L-929-GFP hücrelerinde yeşil floresan proteininin (GFP) stabil ekspresyonu, fibroblast davranışının gerçek zamanlı olarak doğrudan görüntülenmesini ve kantitatif olarak izlenmesini sağlar. Bu hücreler, göç testleri, ortak kültür deneyleri, doku mühendisliği çalışmaları ve canlı hücre görüntüleme gibi floresan tabanlı uygulamalar için özellikle yararlıdır. L-929-GFP hücreleri, ana fibroblast hattının temel biyolojik özelliklerini korurken, karmaşık hücresel ortamlarda hücre lokalizasyonu, proliferasyonu ve etkileşimlerinin izlenmesi için gelişmiş bir kullanım olanağı sunar. Sonuç olarak, bu hücreler stromal hücre dinamikleri, yara iyileşme süreçleri, biyomalzeme uyumluluğu ve bağışıklık aracılı sitotoksik yanıtların araştırılması için çok yönlü bir model görevi görür.

Genetik modifikasyon: ZsGreen1 yeşil floresan protein raportörünü eksprese etmek üzere replikasyon yeteneği olmayan lentiviral transdüksiyon yoluyla stabil bir şekilde modifiye edilmiştir; puromisin seleksiyonu (1–5 µg/mL) altında poliklonal bir popülasyon olarak muhafaza edilir. S1/BSL-1 güvenlik seviyesindedir.

Doku
Bağ dokusu
Eş anlamlılar
  • L929/GL50

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Hücre türü
Fibroblast

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
L929-GFP (Cytion katalog numarası 305956)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
ZsGreen1 (yeşil floresan protein)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 x 104 hücre/cm2
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
100 gün