Премини към съдържанието
L929-GFP
Тъкан
Съединителна тъкан
Синоними
L929/GL50

Документи

L929-GFP

Cell line · Номер на продукта 305956

Клетките L-929-GFP са флуоресцентно маркиран вариант на мишия фибробластен клетъчен линия L-929, която първоначално е била създадена от подкожна съединителна...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание

Клетките L-929-GFP са флуоресцентно маркиран дериват на мишия фибробластен клетъчен линия L-929, която първоначално е била създадена от подкожна съединителна тъкан на възрастна мишка. Родителската линия L-929 е един от най-широко използваните модели на миши фибропласти в биомедицинските изследвания и се характеризира с адхезивен растеж, вретенообразна морфология и силна пролиферативна способност. Клетките L-929 се използват широко в изследвания на цитотоксичност, възпаление, биология на екстрацелуларния матрикс и взаимодействия между гостоприемник и патоген, а също така често се използват за производство и биологично тестване на цитокини като туморен некротичен фактор-α (TNF-α).

Стабилната експресия на зелен флуоресцентен протеин (GFP) в клетките L-929-GFP позволява директна визуализация и количествено проследяване на поведението на фибробластите в реално време. Тези клетки са особено полезни за приложения, базирани на флуоресценция, включително тестове за миграция, експерименти с кокултура, изследвания в областта на тъканното инженерство и визуализация на живи клетки. Клетките L-929-GFP запазват основните биологични характеристики на родителската линия фибропласти, като същевременно осигуряват подобрена функционалност за мониторинг на клетъчната локализация, пролиферация и взаимодействия в сложни клетъчни среди. По този начин те служат като универсален модел за изследване на динамиката на стромалните клетки, процесите на заздравяване на рани, съвместимостта на биоматериалите и имуномедиираните цитотоксични реакции.

Генетична модификация: Стабилно модифицирани чрез репликационно-некомпетентна лентивирусна трансдукция за експресия на репортерния зелен флуоресцентен протеин ZsGreen1; поддържат се като поликлонална популация при селекция с пуромицин (1–5 µg/mL). Ниво на биологична безопасност S1/BSL-1.

Тъкан
Съединителна тъкан
Синоними
  • L929/GL50

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Тип клетка
Фибробласти

04Идентификатори

Източник
L929-GFP (каталожен номер на Cytion 305956)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_E2Z7

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
ZsGreen1 (зелен флуоресцентен протеин)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 до 3 x 104 клетки/cm2
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Контрол на качеството и криоконсервация

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна хранителна среда + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
100 дни