L929-GFP
Cell line · Preces numurs 305956
L-929-GFP šūnas ir fluorescējoši marķēts peles L-929 fibroblastu šūnu līnijas atvasinājums, kas sākotnēji tika izveidots no zemādas saistaudiem...
Pielāgošana / Ieteikumi
- L929-GFPCell line€800.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
L-929-GFP šūnas ir fluorescējoši marķēts peles L-929 fibroblastu šūnu līnijas atvasinājums, kas sākotnēji tika izveidots no pieaugušas peles zemādas saistaudiem. Mātes L-929 līnija ir viens no visplašāk izmantotajiem peles fibroblastu modeļiem biomedicīniskajos pētījumos, un to raksturo adhezīva augšana, vārpstas formas morfoloģija un spēcīga proliferācijas spēja. L-929 šūnas plaši izmanto citotoksicitātes, iekaisuma, ekstracelulārās matricas bioloģijas un saimnieka–patogēna mijiedarbības pētījumos, kā arī tās bieži izmanto tādu citokīnu kā audzēja nekrozes faktora-α (TNF-α) ražošanai un bioloģiskajai analīzei.
Zaļās fluorescences proteīna (GFP) stabilā ekspresija L-929-GFP šūnās ļauj reāllaikā tieši vizualizēt un kvantitatīvi izsekot fibroblastu uzvedībai. Šīs šūnas ir īpaši noderīgas fluorescences balstītiem pielietojumiem, tostarp migrācijas testos, kopkultūras eksperimentos, audu inženierijas pētījumos un dzīvo šūnu attēlveidošanā. L-929-GFP šūnas saglabā sākotnējās fibroblastu līnijas galvenās bioloģiskās īpašības, vienlaikus nodrošinot uzlabotu lietderību šūnu lokalizācijas, proliferācijas un mijiedarbības uzraudzībai sarežģītās šūnu vidēs. Tādējādi tās kalpo kā daudzpusīgs modelis stromas šūnu dinamikas, brūču sadzīšanas procesu, biomateriālu saderības un imūnsistēmas mediētu citotoksisko reakciju izpētei.
Ģenētiskā modifikācija: stabili modificētas ar replikācijas nespējīgu lentivīrusa transdukciju, lai ekspresētu ZsGreen1 zaļās fluorescences proteīna reporteru; tiek uzturētas kā poliklonāla populācija puromicīna selekcijas apstākļos (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 drošības līmenis.
- Audums
- Saistaudi
- Sinonīmi
- L929/GL50
02Klasifikācija
- Organisms
- Pele
- Sekss
- Vīrietis
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- ĢMO statuss
- GMO-S1
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Šūnu tips
- Fibroblasti
04Identifikatori
- Atsauce
- L929-GFP (Cytion kataloga numurs 305956)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_E2Z7
05Pazīmes un uzņēmība
- Antigēna ekspresija
- ZsGreen1 (zaļais fluorescējošais proteīns)
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sēšanas blīvums
- 1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 100 dienas
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
