Pāriet uz saturu
L929-GFP
Audums
Saistaudi
Sinonīmi
L929/GL50

Dokumenti

L929-GFP

Cell line · Preces numurs 305956

L-929-GFP šūnas ir fluorescējoši marķēts peles L-929 fibroblastu šūnu līnijas atvasinājums, kas sākotnēji tika izveidots no zemādas saistaudiem...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

L-929-GFP šūnas ir fluorescējoši marķēts peles L-929 fibroblastu šūnu līnijas atvasinājums, kas sākotnēji tika izveidots no pieaugušas peles zemādas saistaudiem. Mātes L-929 līnija ir viens no visplašāk izmantotajiem peles fibroblastu modeļiem biomedicīniskajos pētījumos, un to raksturo adhezīva augšana, vārpstas formas morfoloģija un spēcīga proliferācijas spēja. L-929 šūnas plaši izmanto citotoksicitātes, iekaisuma, ekstracelulārās matricas bioloģijas un saimnieka–patogēna mijiedarbības pētījumos, kā arī tās bieži izmanto tādu citokīnu kā audzēja nekrozes faktora-α (TNF-α) ražošanai un bioloģiskajai analīzei.

Zaļās fluorescences proteīna (GFP) stabilā ekspresija L-929-GFP šūnās ļauj reāllaikā tieši vizualizēt un kvantitatīvi izsekot fibroblastu uzvedībai. Šīs šūnas ir īpaši noderīgas fluorescences balstītiem pielietojumiem, tostarp migrācijas testos, kopkultūras eksperimentos, audu inženierijas pētījumos un dzīvo šūnu attēlveidošanā. L-929-GFP šūnas saglabā sākotnējās fibroblastu līnijas galvenās bioloģiskās īpašības, vienlaikus nodrošinot uzlabotu lietderību šūnu lokalizācijas, proliferācijas un mijiedarbības uzraudzībai sarežģītās šūnu vidēs. Tādējādi tās kalpo kā daudzpusīgs modelis stromas šūnu dinamikas, brūču sadzīšanas procesu, biomateriālu saderības un imūnsistēmas mediētu citotoksisko reakciju izpētei.

Ģenētiskā modifikācija: stabili modificētas ar replikācijas nespējīgu lentivīrusa transdukciju, lai ekspresētu ZsGreen1 zaļās fluorescences proteīna reporteru; tiek uzturētas kā poliklonāla populācija puromicīna selekcijas apstākļos (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 drošības līmenis.

Audums
Saistaudi
Sinonīmi
  • L929/GL50

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Fibroblasti

04Identifikatori

Atsauce
L929-GFP (Cytion kataloga numurs 305956)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
ZsGreen1 (zaļais fluorescējošais proteīns)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
100 dienas