L929-GFP
Cell line · Product number 305956
L-929-GFP cells are a fluorescently labeled derivative of the murine L-929 fibroblast cell line, which was originally established from subcutaneous connec...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
תאי L-929-GFP הם נגזרת המסומנת בפלואורסצנציה של קו התאים הפיברובלסטי L-929 של עכברים, אשר הוקם במקור מרקמת חיבור תת-עורית של עכבר בוגר. קו ה-L-929 ההורי הוא אחד המודלים הנפוצים ביותר של פיברובלסטים של עכברים במחקר ביו-רפואי, והוא מאופיין בצמיחה דבקה, במורפולוגיה בצורת ציר וביכולת התרבות חזקה. תאי L-929 נמצאים בשימוש נרחב במחקרים העוסקים בציטוטוקסיות, דלקת, ביולוגיה של המטריצה החוץ-תאית ואינטראקציות בין מארח לפתוגן, והם משמשים גם לייצור ולבדיקה ביולוגית של ציטוקינים כגון גורם נמק הגידול-α (TNF-α).
הביטוי היציב של חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP) בתאי L-929-GFP מאפשר הדמיה ישירה ומעקב כמותי אחר התנהגות הפיברובלסטים בזמן אמת. תאים אלה שימושיים במיוחד ליישומים מבוססי פלואורסצנציה, לרבות בדיקות נדידה, ניסויי תרבית משותפת, מחקרים בהנדסת רקמות והדמיית תאים חיים. תאי L-929-GFP שומרים על המאפיינים הביולוגיים המרכזיים של קו הפיברובלסטים ההורי, תוך שהם מספקים תועלת משופרת לניטור מיקום התאים, התרבותם והאינטראקציות שלהם בסביבות תאיות מורכבות. כתוצאה מכך, הם משמשים כמודל רב-תכליתי לחקר הדינמיקה של תאי הסטרומה, תהליכי ריפוי פצעים, תאימות של חומרים ביולוגיים ותגובות ציטוטוקסיות מתווכות חיסונית.
שינוי גנטי: שונו באופן יציב באמצעות העברה לנטרווירוס שאינו מסוגל לשכפל את עצמו, כדי לבטא את החלבון הזוהר הירוק ZsGreen1; נשמרים כאוכלוסייה פוליקלונלית תחת סלקציה לפורומיצין (1–5 µg/mL). רמת אבטחה S1/BSL-1.
- Tissue
- רקמת חיבור
- Synonyms
- L929/GL50
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Cell type
- פיברובלסט
04Identifiers
- Citation
- L929-GFP (מספר קטלוגי של Cytion: 305956)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_E2Z7
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- ZsGreen1 (חלבון פלואורסצנטי ירוק)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 100 ימים
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
