Preskoči na vsebino
L929-GFP
Tkivo
Vezivno tkivo
Sinonimi
L929/GL50

Dokumenti

L929-GFP

Cell line · Številka izdelka 305956

Celice L-929-GFP so fluorescenčno označena različica mišje fibroblastne celične linije L-929, ki je bila prvotno vzpostavljena iz podkožnega vezivnega...

€800.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celice L-929-GFP so fluorescenčno označena različica mišje linije fibroblastov L-929, ki je bila prvotno vzpostavljena iz podkožnega vezivnega tkiva odrasle miši. Izvorna linija L-929 je eden najpogosteje uporabljanih mišjih fibroblastnih modelov v biomedicinskih raziskavah in se odlikuje po adhezivni rasti, vretenasti morfologiji ter močni sposobnosti proliferacije. Celice L-929 se široko uporabljajo v študijah citotoksičnosti, vnetja, biologije ekstracelularne matrice ter interakcij med gostiteljem in patogenom, pogosto pa se uporabljajo tudi za proizvodnjo in biološko testiranje citokinov, kot je tumor nekrotični faktor-α (TNF-α).

Stabilna ekspresija zelenega fluorescenčnega proteina (GFP) v celicah L-929-GFP omogoča neposredno vizualizacijo in kvantitativno spremljanje vedenja fibroblastov v realnem času. Te celice so še posebej uporabne za aplikacije, ki temeljijo na fluorescenci, vključno s testi migracije, poskusi s kokulturo, študijami tkivnega inženirstva in slikanjem živih celic. Celice L-929-GFP ohranjajo osnovne biološke lastnosti izvorne linije fibroblastov, hkrati pa omogočajo izboljšano uporabnost pri spremljanju lokalizacije celic, proliferacije in interakcij v kompleksnih celičnih okoljih. Zato služijo kot vsestranski model za preučevanje dinamike stromalnih celic, procesov celjenja ran, združljivosti biomaterialov in imunsko posredovanih citotoksičnih odzivov.

Genetska modifikacija: Stabilno modificirane z replikacijsko nesposobno lentiviralno transdukcijo za izražanje zelenega fluorescenčnega beljakovinskega reporterja ZsGreen1; vzdržujejo se kot poliklonalna populacija pod selekcijo s puromicinom (1–5 µg/mL). Varnostna stopnja S1/BSL-1.

Tkivo
Vezivno tkivo
Sinonimi
  • L929/GL50

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Vrsta celice
Fibroblast

04Identifikatorji

Navajanje vira
L929-GFP (kataloška številka Cytion 305956)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
ZsGreen1 (zeleni fluorescenčni protein)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 do 3 x 104 celic/cm2
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
100 dni