Skip to content
L929-GFP
Tissue
เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน
Synonyms
L929/GL50

Documents

L929-GFP

Cell line · Product number 305956

L-929-GFP cells are a fluorescently labeled derivative of the murine L-929 fibroblast cell line, which was originally established from subcutaneous connec...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

เซลล์ L-929-GFP เป็นสายพันธุ์เซลล์ไฟโบรบลาสต์ L-929 ของหนูที่ได้รับการติดฉลากด้วยสารเรืองแสง ซึ่งถูกสร้างขึ้นครั้งแรกจากเนื้อเยื่อเกี่ยวพันใต้ผิวหนังของหนูผู้ใหญ่ สายเซลล์ L-929 ต้นแบบเป็นหนึ่งในแบบจำลองเซลล์ไฟโบรบลาสต์ของหนูที่ถูกใช้อย่างแพร่หลายที่สุดในการวิจัยทางชีวการแพทย์ และมีลักษณะเด่นคือการเจริญเติบโตแบบยึดติดกับพื้นผิว รูปร่างคล้ายแกนหมุน และความสามารถในการเพิ่มจำนวนที่แข็งแกร่ง เซลล์ L-929 ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาเกี่ยวกับความเป็นพิษต่อเซลล์ การอักเสบ ชีววิทยาของแมทริกซ์นอกเซลล์ และปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อโรค นอกจากนี้ยังถูกใช้อย่างทั่วไปในการผลิตและการทดสอบทางชีวภาพของไซโตไคน์ เช่น ปัจจัยทำลายเนื้องอก-α (TNF-α)

การแสดงออกอย่างเสถียรของโปรตีนเรืองแสงสีเขียว (GFP) ในเซลล์ L-929-GFP ช่วยให้สามารถสังเกตและติดตามพฤติกรรมของไฟโบรบลาสต์ได้อย่างเป็นรูปธรรมและเชิงปริมาณในเวลาจริง เซลล์เหล่านี้มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับการประยุกต์ใช้ที่อาศัยการเรืองแสง เช่น การทดสอบการเคลื่อนที่ การทดลองการเพาะเลี้ยงร่วม การศึกษาวิศวกรรมเนื้อเยื่อ และการถ่ายภาพเซลล์สด เซลล์ L-929-GFP ยังคงรักษาลักษณะทางชีวภาพหลักของสายเซลล์ไฟโบรบลาสต์ต้นแบบไว้ พร้อมทั้งเพิ่มประโยชน์ในการติดตามตำแหน่งของเซลล์ การเพิ่มจำนวน และการปฏิสัมพันธ์ภายในสภาพแวดล้อมเซลล์ที่ซับซ้อน ดังนั้น เซลล์เหล่านี้จึงทำหน้าที่เป็นแบบจำลองที่หลากหลายสำหรับการศึกษาพลวัตของเซลล์สโตรมา กระบวนการสมานแผล ความเข้ากันได้ของวัสดุชีวภาพ และปฏิกิริยาไซโตท็อกซิกที่อาศัยระบบภูมิคุ้มกัน

การดัดแปลงทางพันธุกรรม: ถูกดัดแปลงอย่างเสถียรโดยวิธีการถ่ายโอนด้วยเลนติไวรัสที่ไม่สามารถทำซ้ำได้ เพื่อแสดงโปรตีนเรพอร์เตอร์ฟลูออเรสเซนต์สีเขียว ZsGreen1; รักษาไว้เป็นประชากรโพลีโคลนอลภายใต้การคัดเลือกด้วยพูโรไมซิน (1–5 µg/mL). ระดับความปลอดภัย S1/BSL-1.

Tissue
เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน
Synonyms
  • L929/GL50

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
ไฟโบรบลาสต์

04Identifiers

Citation
L929-GFP (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305956)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Expression and susceptibility

Antigen expression
ZsGreen1 (โปรตีนเรืองแสงสีเขียว)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 ถึง 3 x 104 เซลล์/เซนติเมตร²
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
100 วัน