L929-GFP
Cell line · Product number 305956
L-929-GFP cells are a fluorescently labeled derivative of the murine L-929 fibroblast cell line, which was originally established from subcutaneous connec...
Customization / Recommendations
- L929-GFPCell line€800.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
Tế bào L-929-GFP là một biến thể được đánh dấu huỳnh quang của dòng tế bào nguyên bào sợi L-929 ở chuột, vốn được phân lập ban đầu từ mô liên kết dưới da của một con chuột trưởng thành. Dòng tế bào L-929 gốc là một trong những mô hình tế bào sợi chuột được sử dụng rộng rãi nhất trong nghiên cứu y sinh và được đặc trưng bởi khả năng phát triển bám dính, hình thái hình trục và khả năng sinh sôi mạnh mẽ. Tế bào L-929 được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu về độc tính tế bào, viêm nhiễm, sinh học ma trận ngoại bào và tương tác giữa vật chủ và tác nhân gây bệnh; đồng thời chúng cũng thường được dùng để sản xuất và thử nghiệm sinh học các cytokine như yếu tố hoại tử khối u-α (TNF-α).
Sự biểu hiện ổn định của protein huỳnh quang xanh (GFP) trong tế bào L-929-GFP cho phép quan sát trực tiếp và theo dõi định lượng hành vi của tế bào sợi trong thời gian thực. Các tế bào này đặc biệt hữu ích cho các ứng dụng dựa trên huỳnh quang, bao gồm các thử nghiệm di chuyển, thí nghiệm đồng nuôi cấy, nghiên cứu kỹ thuật mô và hình ảnh tế bào sống. Các tế bào L-929-GFP vẫn giữ nguyên các đặc tính sinh học cốt lõi của dòng tế bào sợi gốc, đồng thời mang lại tính ứng dụng cao hơn trong việc theo dõi vị trí, sự tăng sinh và các tương tác của tế bào trong các môi trường tế bào phức tạp. Do đó, chúng đóng vai trò như một mô hình đa năng để nghiên cứu động học của tế bào mô liên kết, quá trình lành vết thương, tính tương thích của vật liệu sinh học và các phản ứng độc tế bào do miễn dịch trung gian.
Sửa đổi di truyền: Được sửa đổi ổn định bằng phương pháp truyền lentivirus không có khả năng nhân lên để biểu hiện protein báo hiệu huỳnh quang xanh ZsGreen1; được duy trì dưới dạng quần thể đa dòng dưới sự chọn lọc bằng puromycin (1–5 µg/mL). Mức độ an toàn S1/BSL-1.
- Tissue
- Mô liên kết
- Synonyms
- L929/GL50
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Cell type
- Tế bào sợi
04Identifiers
- Citation
- L929-GFP (Mã sản phẩm Cytion: 305956)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_E2Z7
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- ZsGreen1 (protein huỳnh quang màu xanh lá cây)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.
- Supplements
- Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
- Seeding density
- 1 đến 3 × 10⁴ tế bào/cm²
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Với tư cách là môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sót sau khi rã đông.
- Storage conditions
Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.
- Shipping conditions
Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.
08Donor
- Donor age
- 100 ngày
09Legal and safety
- Safety precautions
- Khi lập kế hoạch lưu trữ ống cryovial trong nitơ lỏng để rã đông sau này, việc tuân thủ các biện pháp an toàn nghiêm ngặt là bắt buộc. Găng tay và quần áo bảo hộ phù hợp là điều cần thiết, và việc sử dụng khẩu trang hoặc kính bảo hộ là bắt buộc trong quá trình chuyển mẫu đông lạnh vào hoặc ra khỏi bể nitơ lỏng. Điều này nhằm giảm thiểu nguy cơ chấn thương do nổ ống cryovial khi lấy ra, có thể dẫn đến việc văng ra các mảnh vỡ sắc nhọn.
- Warranty
Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.
Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
