Skip to content
L929-GFP
Tissue
Mô liên kết
Synonyms
L929/GL50

Documents

L929-GFP

Cell line · Product number 305956

L-929-GFP cells are a fluorescently labeled derivative of the murine L-929 fibroblast cell line, which was originally established from subcutaneous connec...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

Tế bào L-929-GFP là một biến thể được đánh dấu huỳnh quang của dòng tế bào nguyên bào sợi L-929 ở chuột, vốn được phân lập ban đầu từ mô liên kết dưới da của một con chuột trưởng thành. Dòng tế bào L-929 gốc là một trong những mô hình tế bào sợi chuột được sử dụng rộng rãi nhất trong nghiên cứu y sinh và được đặc trưng bởi khả năng phát triển bám dính, hình thái hình trục và khả năng sinh sôi mạnh mẽ. Tế bào L-929 được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu về độc tính tế bào, viêm nhiễm, sinh học ma trận ngoại bào và tương tác giữa vật chủ và tác nhân gây bệnh; đồng thời chúng cũng thường được dùng để sản xuất và thử nghiệm sinh học các cytokine như yếu tố hoại tử khối u-α (TNF-α).

Sự biểu hiện ổn định của protein huỳnh quang xanh (GFP) trong tế bào L-929-GFP cho phép quan sát trực tiếp và theo dõi định lượng hành vi của tế bào sợi trong thời gian thực. Các tế bào này đặc biệt hữu ích cho các ứng dụng dựa trên huỳnh quang, bao gồm các thử nghiệm di chuyển, thí nghiệm đồng nuôi cấy, nghiên cứu kỹ thuật mô và hình ảnh tế bào sống. Các tế bào L-929-GFP vẫn giữ nguyên các đặc tính sinh học cốt lõi của dòng tế bào sợi gốc, đồng thời mang lại tính ứng dụng cao hơn trong việc theo dõi vị trí, sự tăng sinh và các tương tác của tế bào trong các môi trường tế bào phức tạp. Do đó, chúng đóng vai trò như một mô hình đa năng để nghiên cứu động học của tế bào mô liên kết, quá trình lành vết thương, tính tương thích của vật liệu sinh học và các phản ứng độc tế bào do miễn dịch trung gian.

Sửa đổi di truyền: Được sửa đổi ổn định bằng phương pháp truyền lentivirus không có khả năng nhân lên để biểu hiện protein báo hiệu huỳnh quang xanh ZsGreen1; được duy trì dưới dạng quần thể đa dòng dưới sự chọn lọc bằng puromycin (1–5 µg/mL). Mức độ an toàn S1/BSL-1.

Tissue
Mô liên kết
Synonyms
  • L929/GL50

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
Tế bào sợi

04Identifiers

Citation
L929-GFP (Mã sản phẩm Cytion: 305956)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Expression and susceptibility

Antigen expression
ZsGreen1 (protein huỳnh quang màu xanh lá cây)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 đến 3 × 10⁴ tế bào/cm²
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Với tư cách là môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sót sau khi rã đông.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
100 ngày