Tartalomra ugrás
L929-GFP
Szövet
Kötőszövet
Szinonimák
L929/GL50

Dokumentumok

L929-GFP

Cell line · Termékszám 305956

Az L-929-GFP sejtek az egér L-929 fibroblaszt sejtvonal fluoreszcens jelöléssel ellátott származékai, amelyet eredetileg szubkután kötőszövetből állítottak elő...

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

Az L-929-GFP sejtek az egér L-929 fibroblaszt sejtvonal fluoreszcens jelöléssel ellátott származékai, amelyet eredetileg egy felnőtt egér bőr alatti kötőszövetéből állítottak elő. Az eredeti L-929 vonal az egyik legszélesebb körben használt egér fibroblasztmodell az orvostudományi kutatásban, amelyet adhezív növekedése, orsó alakú morfológiája és erős proliferációs képessége jellemez. Az L-929 sejteket széles körben használják citotoxicitási, gyulladásos, extracelluláris mátrix-biológiai és gazda–kórokozó kölcsönhatások vizsgálatában, valamint gyakran alkalmazzák olyan citokinek előállítására és biológiai vizsgálatára is, mint például a tumor nekrózis faktor-α (TNF-α).

A zöld fluoreszcens fehérje (GFP) stabil expressziója az L-929-GFP sejtekben lehetővé teszi a fibroblasztok viselkedésének közvetlen, valós idejű vizualizálását és kvantitatív nyomon követését. Ezek a sejtek különösen hasznosak a fluoreszcencia-alapú alkalmazásokhoz, ideértve a migrációs vizsgálatokat, a ko-kultúra kísérleteket, a szövetmérnöki kutatásokat és az élő sejtek képalkotását. Az L-929-GFP sejtek megőrzik az anyai fibroblasztvonal alapvető biológiai jellemzőit, miközben fokozottan alkalmasak a sejtek lokalizációjának, proliferációjának és komplex sejtkörnyezetekben zajló kölcsönhatásainak nyomon követésére. Következésképpen sokoldalú modellként szolgálnak a stromális sejtek dinamikájának, a sebgyógyulási folyamatoknak, a biológiai anyagok kompatibilitásának és az immunmediált citotoxikus válaszok vizsgálatához.

Genetikai módosítás: Replikációra képtelen lentivirális transzdukcióval stabilan módosítva a ZsGreen1 zöld fluoreszcens fehérje-riporter expressziójára; puromicin-szelekció (1–5 µg/mL) alatt poliklonális populációként tartva. S1/BSL-1 biztonsági szint.

Szövet
Kötőszövet
Szinonimák
  • L929/GL50

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Sejttípus
Fibroblasztok

04Azonosítók

Hivatkozás
L929-GFP (Cytion katalógusszám: 305956)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
ZsGreen1 (zöld fluoreszkáló fehérje)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1–3 x 104 sejt/cm2
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
100 nap