L929-GFP
Cell line · Termékszám 305956
Az L-929-GFP sejtek az egér L-929 fibroblaszt sejtvonal fluoreszcens jelöléssel ellátott származékai, amelyet eredetileg szubkután kötőszövetből állítottak elő...
Személyre szabás / Ajánlások
- L929-GFPCell line€800.00
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
01Általános információk
- Leírás
Az L-929-GFP sejtek az egér L-929 fibroblaszt sejtvonal fluoreszcens jelöléssel ellátott származékai, amelyet eredetileg egy felnőtt egér bőr alatti kötőszövetéből állítottak elő. Az eredeti L-929 vonal az egyik legszélesebb körben használt egér fibroblasztmodell az orvostudományi kutatásban, amelyet adhezív növekedése, orsó alakú morfológiája és erős proliferációs képessége jellemez. Az L-929 sejteket széles körben használják citotoxicitási, gyulladásos, extracelluláris mátrix-biológiai és gazda–kórokozó kölcsönhatások vizsgálatában, valamint gyakran alkalmazzák olyan citokinek előállítására és biológiai vizsgálatára is, mint például a tumor nekrózis faktor-α (TNF-α).
A zöld fluoreszcens fehérje (GFP) stabil expressziója az L-929-GFP sejtekben lehetővé teszi a fibroblasztok viselkedésének közvetlen, valós idejű vizualizálását és kvantitatív nyomon követését. Ezek a sejtek különösen hasznosak a fluoreszcencia-alapú alkalmazásokhoz, ideértve a migrációs vizsgálatokat, a ko-kultúra kísérleteket, a szövetmérnöki kutatásokat és az élő sejtek képalkotását. Az L-929-GFP sejtek megőrzik az anyai fibroblasztvonal alapvető biológiai jellemzőit, miközben fokozottan alkalmasak a sejtek lokalizációjának, proliferációjának és komplex sejtkörnyezetekben zajló kölcsönhatásainak nyomon követésére. Következésképpen sokoldalú modellként szolgálnak a stromális sejtek dinamikájának, a sebgyógyulási folyamatoknak, a biológiai anyagok kompatibilitásának és az immunmediált citotoxikus válaszok vizsgálatához.
Genetikai módosítás: Replikációra képtelen lentivirális transzdukcióval stabilan módosítva a ZsGreen1 zöld fluoreszcens fehérje-riporter expressziójára; puromicin-szelekció (1–5 µg/mL) alatt poliklonális populációként tartva. S1/BSL-1 biztonsági szint.
- Szövet
- Kötőszövet
- Szinonimák
- L929/GL50
02Osztályozás
- Organizmus
- Egér
- Szex
- Férfi
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- GMO-státusz
- GMO-S1
- A GMO-státuszra vonatkozó részletek
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Sejttípus
- Fibroblasztok
04Azonosítók
- Hivatkozás
- L929-GFP (Cytion katalógusszám: 305956)
- NCBI adóazonosító szám
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_E2Z7
05Kifejeződés és fogékonyság
- Antigén-expresszió
- ZsGreen1 (zöld fluoreszkáló fehérje)
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Ültetési sűrűség
- 1–3 x 104 sejt/cm2
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Az adományozó életkora
- 100 nap
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen
