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L929-GFP
Tissue
Tecido conjuntivo
Synonyms
L929/GL50

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L929-GFP

Cell line · Product number 305956

L-929-GFP cells are a fluorescently labeled derivative of the murine L-929 fibroblast cell line, which was originally established from subcutaneous connec...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

As células L-929-GFP são um derivado marcado com fluorescência da linhagem celular de fibroblastos murinos L-929, que foi originalmente estabelecida a partir do tecido conjuntivo subcutâneo de um camundongo adulto. A linhagem parental L-929 é um dos modelos de fibroblastos de camundongo mais amplamente utilizados na pesquisa biomédica e se caracteriza por seu crescimento aderente, morfologia fusiforme e robusta capacidade proliferativa. As células L-929 são amplamente utilizadas em estudos de citotoxicidade, inflamação, biologia da matriz extracelular e interações hospedeiro-patógeno, além de serem comumente empregadas para a produção e bioensaio de citocinas, como o fator de necrose tumoral-α (TNF-α).

A expressão estável da proteína fluorescente verde (GFP) nas células L-929-GFP permite a visualização direta e o acompanhamento quantitativo do comportamento dos fibroblastos em tempo real. Essas células são particularmente úteis para aplicações baseadas em fluorescência, incluindo ensaios de migração, experimentos de cocultura, estudos de engenharia de tecidos e imagens de células vivas. As células L-929-GFP mantêm as principais características biológicas da linhagem parental de fibroblastos, ao mesmo tempo em que oferecem maior utilidade para o monitoramento da localização celular, proliferação e interações em ambientes celulares complexos. Consequentemente, elas servem como um modelo versátil para a investigação da dinâmica das células estromais, processos de cicatrização de feridas, compatibilidade de biomateriais e respostas citotóxicas imunomediadas.

Modificação genética: Modificadas de forma estável por transdução lentiviral incompetente para replicação, a fim de expressar o repórter da proteína fluorescente verde ZsGreen1; mantidas como uma população policlonal sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). Contenção S1/BSL-1.

Tissue
Tecido conjuntivo
Synonyms
  • L929/GL50

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
Fibroblasto

04Identifiers

Citation
L929-GFP (número de catálogo da Cytion 305956)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Expression and susceptibility

Antigen expression
ZsGreen1 (proteína fluorescente verde)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
100 dias