L929-GFP
Cell line · Product number 305956
L-929-GFP cells are a fluorescently labeled derivative of the murine L-929 fibroblast cell line, which was originally established from subcutaneous connec...
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01General information
- Description
As células L-929-GFP são um derivado marcado com fluorescência da linhagem celular de fibroblastos murinos L-929, que foi originalmente estabelecida a partir do tecido conjuntivo subcutâneo de um camundongo adulto. A linhagem parental L-929 é um dos modelos de fibroblastos de camundongo mais amplamente utilizados na pesquisa biomédica e se caracteriza por seu crescimento aderente, morfologia fusiforme e robusta capacidade proliferativa. As células L-929 são amplamente utilizadas em estudos de citotoxicidade, inflamação, biologia da matriz extracelular e interações hospedeiro-patógeno, além de serem comumente empregadas para a produção e bioensaio de citocinas, como o fator de necrose tumoral-α (TNF-α).
A expressão estável da proteína fluorescente verde (GFP) nas células L-929-GFP permite a visualização direta e o acompanhamento quantitativo do comportamento dos fibroblastos em tempo real. Essas células são particularmente úteis para aplicações baseadas em fluorescência, incluindo ensaios de migração, experimentos de cocultura, estudos de engenharia de tecidos e imagens de células vivas. As células L-929-GFP mantêm as principais características biológicas da linhagem parental de fibroblastos, ao mesmo tempo em que oferecem maior utilidade para o monitoramento da localização celular, proliferação e interações em ambientes celulares complexos. Consequentemente, elas servem como um modelo versátil para a investigação da dinâmica das células estromais, processos de cicatrização de feridas, compatibilidade de biomateriais e respostas citotóxicas imunomediadas.
Modificação genética: Modificadas de forma estável por transdução lentiviral incompetente para replicação, a fim de expressar o repórter da proteína fluorescente verde ZsGreen1; mantidas como uma população policlonal sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). Contenção S1/BSL-1.
- Tissue
- Tecido conjuntivo
- Synonyms
- L929/GL50
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Cell type
- Fibroblasto
04Identifiers
- Citation
- L929-GFP (número de catálogo da Cytion 305956)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_E2Z7
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- ZsGreen1 (proteína fluorescente verde)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Seeding density
- 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 100 dias
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
