L929-GFP
Cell line · Numer produktu 305956
Komórki L-929-GFP stanowią znakowaną fluorescencyjnie odmianę mysiej linii komórkowej fibroblastów L-929, która została pierwotnie wyhodowana z podskórnej tkanki łącznej...
Dostosowanie / Zalecenia
- L929-GFPCell line€800.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Komórki L-929-GFP stanowią znakowaną fluorescencyjnie odmianę mysiej linii komórkowej fibroblastów L-929, która została pierwotnie wyhodowana z podskórnej tkanki łącznej dorosłej myszy. Macierzysta linia L-929 jest jednym z najczęściej wykorzystywanych mysich modeli fibroblastów w badaniach biomedycznych i charakteryzuje się wzrostem adhezyjnym, morfologią wrzecionowatą oraz silną zdolnością proliferacyjną. Komórki L-929 są szeroko wykorzystywane w badaniach nad cytotoksycznością, stanem zapalnym, biologią macierzy pozakomórkowej oraz interakcjami między gospodarzem a patogenem; są one również powszechnie stosowane do produkcji i testów biologicznych cytokin, takich jak czynnik martwicy nowotworów α (TNF-α).
Stabilna ekspresja zielonego białka fluorescencyjnego (GFP) w komórkach L-929-GFP umożliwia bezpośrednią wizualizację i ilościowe śledzenie zachowania fibroblastów w czasie rzeczywistym. Komórki te są szczególnie przydatne w zastosowaniach opartych na fluorescencji, w tym w testach migracji, eksperymentach z hodowlą mieszaną, badaniach z zakresu inżynierii tkankowej oraz obrazowaniu żywych komórek. Komórki L-929-GFP zachowują podstawowe cechy biologiczne macierzystej linii fibroblastów, zapewniając jednocześnie zwiększoną użyteczność w monitorowaniu lokalizacji komórek, ich proliferacji oraz interakcji w złożonych środowiskach komórkowych. W związku z tym służą one jako wszechstronny model do badania dynamiki komórek zrębu, procesów gojenia ran, kompatybilności biomateriałów oraz odpowiedzi cytotoksycznych o podłożu immunologicznym.
Modyfikacja genetyczna: Stabilnie zmodyfikowane poprzez transdukcję lentiwirusową bez zdolności do replikacji w celu ekspresji reporterowego białka fluorescencyjnego ZsGreen1; utrzymywane jako populacja poliklonalna pod selekcją puromycyną (1–5 µg/ml). Poziom bezpieczeństwa S1/BSL-1.
- Chusteczka
- Tkanka łączna
- Synonimy
- L929/GL50
02Klasyfikacja
- Organizm
- Mysz
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO-S1
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Typ komórki
- Fibroblast
04Identyfikatory
- Źródło
- L929-GFP (numer katalogowy Cytion 305956)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_E2Z7
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja antygenu
- ZsGreen1 (zielone białko fluorescencyjne)
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Gęstość wysiewu
- 1 do 3 x 104 komórek/cm2
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 100 dni
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
