Przejdź do treści
L929-GFP
Chusteczka
Tkanka łączna
Synonimy
L929/GL50

Dokumenty

L929-GFP

Cell line · Numer produktu 305956

Komórki L-929-GFP stanowią znakowaną fluorescencyjnie odmianę mysiej linii komórkowej fibroblastów L-929, która została pierwotnie wyhodowana z podskórnej tkanki łącznej...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki L-929-GFP stanowią znakowaną fluorescencyjnie odmianę mysiej linii komórkowej fibroblastów L-929, która została pierwotnie wyhodowana z podskórnej tkanki łącznej dorosłej myszy. Macierzysta linia L-929 jest jednym z najczęściej wykorzystywanych mysich modeli fibroblastów w badaniach biomedycznych i charakteryzuje się wzrostem adhezyjnym, morfologią wrzecionowatą oraz silną zdolnością proliferacyjną. Komórki L-929 są szeroko wykorzystywane w badaniach nad cytotoksycznością, stanem zapalnym, biologią macierzy pozakomórkowej oraz interakcjami między gospodarzem a patogenem; są one również powszechnie stosowane do produkcji i testów biologicznych cytokin, takich jak czynnik martwicy nowotworów α (TNF-α).

Stabilna ekspresja zielonego białka fluorescencyjnego (GFP) w komórkach L-929-GFP umożliwia bezpośrednią wizualizację i ilościowe śledzenie zachowania fibroblastów w czasie rzeczywistym. Komórki te są szczególnie przydatne w zastosowaniach opartych na fluorescencji, w tym w testach migracji, eksperymentach z hodowlą mieszaną, badaniach z zakresu inżynierii tkankowej oraz obrazowaniu żywych komórek. Komórki L-929-GFP zachowują podstawowe cechy biologiczne macierzystej linii fibroblastów, zapewniając jednocześnie zwiększoną użyteczność w monitorowaniu lokalizacji komórek, ich proliferacji oraz interakcji w złożonych środowiskach komórkowych. W związku z tym służą one jako wszechstronny model do badania dynamiki komórek zrębu, procesów gojenia ran, kompatybilności biomateriałów oraz odpowiedzi cytotoksycznych o podłożu immunologicznym.

Modyfikacja genetyczna: Stabilnie zmodyfikowane poprzez transdukcję lentiwirusową bez zdolności do replikacji w celu ekspresji reporterowego białka fluorescencyjnego ZsGreen1; utrzymywane jako populacja poliklonalna pod selekcją puromycyną (1–5 µg/ml). Poziom bezpieczeństwa S1/BSL-1.

Chusteczka
Tkanka łączna
Synonimy
  • L929/GL50

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Typ komórki
Fibroblast

04Identyfikatory

Źródło
L929-GFP (numer katalogowy Cytion 305956)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
ZsGreen1 (zielone białko fluorescencyjne)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 do 3 x 104 komórek/cm2
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
100 dni