L929-GFP

Las células L-929-GFP son un derivado marcado con fluorescencia de la línea celular de fibroblastos murinos L-929, que se estableció originalmente a partir del tejido conectivo subcutáneo de un ratón adulto. La línea parental L-929 es uno de los modelos de fibroblastos de ratón más utilizados en la investigación biomédica y se caracteriza por su crecimiento adherente, su morfología fusiforme y su gran capacidad proliferativa. Las células L-929 se utilizan ampliamente en estudios de citotoxicidad, inflamación, biología de la matriz extracelular e interacciones entre el huésped y el patógeno, y también se emplean habitualmente para la producción y el bioensayo de citocinas como el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α).

La expresión estable de la proteína fluorescente verde (GFP) en las células L-929-GFP permite la visualización directa y el seguimiento cuantitativo del comportamiento de los fibroblastos en tiempo real. Estas células resultan especialmente útiles para aplicaciones basadas en la fluorescencia, como ensayos de migración, experimentos de cocultivo, estudios de ingeniería tisular e imagenología de células vivas. Las células L-929-GFP conservan las características biológicas fundamentales de la línea parental de fibroblastos, al tiempo que ofrecen una mayor utilidad para monitorizar la localización celular, la proliferación y las interacciones en entornos celulares complejos. En consecuencia, sirven como modelo versátil para investigar la dinámica de las células estromales, los procesos de cicatrización de heridas, la compatibilidad de los biomateriales y las respuestas citotóxicas mediadas por el sistema inmunitario.

Modificación genética: modificadas de forma estable mediante transducción con lentivirus incompetentes para la replicación, a fin de expresar el reportero de proteína fluorescente verde ZsGreen1; se mantienen como una población policlonal bajo selección con puromicina (1-5 µg/mL). Nivel de contención S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

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