Mine otse sisu juurde
L929-GFP
Kude
Sidekude
Sünonüümid
L929/GL50

Dokumendid

L929-GFP

Cell line · Toote number 305956

L-929-GFP-rakud on hiire L-929 fibroblastide rakuliini fluorestsentsmärgistatud derivaat, mis loodi algselt nahaaluse sidekoe põhjal...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

L-929-GFP-rakud on hiire L-929 fibroblastide rakuliini fluorestsentsmärgistatud derivaat, mis loodi algselt täiskasvanud hiire nahaaluse sidekoe põhjal. Ema-rakuliin L-929 on üks biomeditsiinilises uurimistöös kõige laialdasemalt kasutatavaid hiire fibroblastimudeleid ning seda iseloomustab adhesiivne kasv, värtjas morfoloogia ja tugev proliferatsioonivõime. L-929-rakke kasutatakse laialdaselt tsütotoksilisuse, põletiku, ekstratsellulaarse maatriksi bioloogia ja peremees-patogeeni vastasmõju uuringutes ning neid kasutatakse sageli ka tsütokiinide, nagu näiteks tuumornekroosifaktori-α (TNF-α), tootmiseks ja bioloogiliseks analüüsiks.

Rohelise fluorestsentsvalgu (GFP) stabiilne ekspressioon L-929-GFP-rakkudes võimaldab fibroblastide käitumise otsest visualiseerimist ja kvantitatiivset jälgimist reaalajas. Need rakud on eriti kasulikud fluorestsentsipõhistes rakendustes, sealhulgas migratsioonianalüüsides, ko-kultuuri katsetes, koetehnoloogia uuringutes ja elusrakkude pildistamises. L-929-GFP-rakud säilitavad emarakuliini peamised bioloogilised omadused, pakkudes samal ajal paremat kasulikkust rakkude lokaliseerimise, proliferatsiooni ja interaktsioonide jälgimiseks keerulistes rakukeskkondades. Seetõttu sobivad need mitmekülgseks mudeliks stroomaalrakkude dünaamika, haavade paranemisprotsesside, biomaterjalide sobivuse ja immuunvahendatud tsütotoksiliste reaktsioonide uurimiseks.

Geneetiline modifikatsioon: stabiilselt modifitseeritud replikatsioonivõimetu lentiviiruse transduktsiooni abil, et ekspresseerida rohelist fluorestsentsvalku ZsGreen1; hoitakse polükloonilise populatsioonina puromütsiini selektsiooni all (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 ohutustase.

Kude
Sidekude
Sünonüümid
  • L929/GL50

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Fibroblastide

04Tunnused

Viide
L929-GFP (Cytioni katalooginumber 305956)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
ZsGreen1 (roheline fluorestsentsvalk)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
100 päeva