Gå til innholdet
L929-GFP
Vev
Bindevev
Synonymer
L929/GL50

Dokumenter

L929-GFP

Cell line · Produktnummer 305956

L-929-GFP-celler er et fluorescerende merket avledet av den murine L-929-fibroblastcellelinjen, som opprinnelig ble etablert fra subkutan bindevev...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

L-929-GFP-celler er et fluorescerende merket avledet av den murine L-929-fibroblastcellelinjen, som opprinnelig ble etablert fra subkutant bindevev fra en voksen mus. Den opprinnelige L-929-linjen er en av de mest brukte fibroblastmodellene fra mus i biomedisinsk forskning og kjennetegnes ved sin vedheftende vekst, spindelformede morfologi og robuste proliferasjonsevne. L-929-celler brukes mye i studier av cytotoksisitet, betennelse, ekstracellulær matriksbiologi og interaksjoner mellom vert og patogen, og de brukes også ofte til produksjon og bioassay av cytokiner som tumornekrosefaktor-α (TNF-α).

Den stabile ekspresjonen av grønt fluorescerende protein (GFP) i L-929-GFP-celler muliggjør direkte visualisering og kvantitativ sporing av fibroblasters atferd i sanntid. Disse cellene er særlig nyttige for fluorescensbaserte anvendelser, inkludert migrasjonsanalyser, samdyrkningsforsøk, studier innen vevsteknikk og avbildning av levende celler. L-929-GFP-celler beholder de sentrale biologiske egenskapene til den opprinnelige fibroblastlinjen, samtidig som de gir forbedrede muligheter for overvåking av cellelokalisering, proliferasjon og interaksjoner i komplekse cellulære miljøer. Følgelig fungerer de som en allsidig modell for å undersøke dynamikken i stromaceller, sårhelingsprosesser, biomaterialkompatibilitet og immunmedierte cytotoksiske responser.

Genetisk modifisering: Stabilt modifisert ved replikasjonsinkompetent lentiviral transduksjon for å uttrykke det grønne fluorescerende proteinet ZsGreen1 som reporter; opprettholdes som en polyklonal populasjon under puromycin-seleksjon (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-inneslutning.

Vev
Bindevev
Synonymer
  • L929/GL50

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Celletype
Fibroblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
L929-GFP (Cytion-katalognummer 305956)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
ZsGreen1 (grønt fluorescerende protein)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 til 3 x 104 celler/cm2
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
100 dager