Přejít na obsah
L929-GFP
Tkáň
Pojivová tkáň
Synonyma
L929/GL50

Dokumenty

L929-GFP

Cell line · Číslo výrobku 305956

Buňky L-929-GFP jsou fluorescenčně značenou odnoží myší fibroblastové buněčné linie L-929, která byla původně izolována z podkožní pojivové tkáně...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buňky L-929-GFP jsou fluorescenčně značeným derivátem myší fibroblastové buněčné linie L-929, která byla původně izolována z podkožní pojivové tkáně dospělé myši. Mateřská linie L-929 patří k nejčastěji používaným modelům myších fibroblastů v biomedicínském výzkumu a vyznačuje se adhezivním růstem, vřetenovitou morfologií a silnou proliferační schopností. Buňky L-929 se široce využívají ve studiích cytotoxicity, zánětu, biologie extracelulární matrice a interakcí mezi hostitelem a patogenem a běžně se také používají k produkci a biologickému testování cytokinů, jako je faktor nekrózy nádorů-α (TNF-α).

Stabilní exprese zeleného fluorescenčního proteinu (GFP) v buňkách L-929-GFP umožňuje přímou vizualizaci a kvantitativní sledování chování fibroblastů v reálném čase. Tyto buňky jsou obzvláště užitečné pro aplikace založené na fluorescenci, včetně testů migrace, experimentů s kokulturou, studií tkáňového inženýrství a zobrazování živých buněk. Buňky L-929-GFP si zachovávají základní biologické vlastnosti původní fibroblastové linie a zároveň poskytují vylepšené možnosti pro sledování lokalizace buněk, proliferace a interakcí v komplexních buněčných prostředích. Díky tomu slouží jako univerzální model pro zkoumání dynamiky stromálních buněk, procesů hojení ran, kompatibility biomateriálů a imunitně zprostředkovaných cytotoxických reakcí.

Genetická modifikace: Stabilně modifikovány replikačně nekompetentní lentivirovou transdukcí k expresi reportérového zeleného fluorescenčního proteinu ZsGreen1; udržovány jako polyklonální populace pod selekcí puromycinem (1–5 µg/ml). Úroveň bezpečnosti S1/BSL-1.

Tkáň
Pojivová tkáň
Synonyma
  • L929/GL50

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Typ buňky
Fibroblasty

04Identifikátory

Citace
L929-GFP (katalogové číslo Cytion 305956)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
ZsGreen1 (zelený fluorescenční protein)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buněk/cm2
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
100 dní