الانتقال إلى المحتوى
L929-GFP
الأنسجة
النسيج الضام
المرادفات
L929/GL50

المستندات

L929-GFP

Cell line · رقم المنتج 305956

تُعد خلايا L-929-GFP مشتقًا مُعلَّمًا بالفلورة من سلالة الخلايا الليفية L-929 الفئرانية، التي تم إنشاؤها في الأصل من النسيج الضام تحت الجلد...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

تُعد خلايا L-929-GFP مشتقًا مُعلَّمًا بالفلورة من سلالة الخلايا الليفية L-929 الفئرانية، التي تم إنشاؤها في الأصل من النسيج الضام تحت الجلد لفأر بالغ. ويُعد سلالة L-929 الأصلية واحدة من أكثر نماذج الخلايا الليفية الفئرانية استخدامًا في الأبحاث الطبية الحيوية، وتتميز بنموها اللاصق، وشكلها المغزلي، وقدرتها التكاثرية القوية. تُستخدم خلايا L-929 على نطاق واسع في دراسات السمية الخلوية، والالتهابات، وبيولوجيا المصفوفة خارج الخلية، والتفاعلات بين المضيف والممرض، كما تُستخدم بشكل شائع لإنتاج السيتوكينات وإجراء الاختبارات الحيوية عليها، مثل عامل نخر الورم-ألفا (TNF-α).

يتيح التعبير المستقر للبروتين الفلوري الأخضر (GFP) في خلايا L-929-GFP إمكانية الرؤية المباشرة والتتبع الكمي لسلوك الخلايا الليفية في الوقت الفعلي. وتُعد هذه الخلايا مفيدة بشكل خاص للتطبيقات القائمة على الفلورة، بما في ذلك اختبارات الهجرة، وتجارب الزراعة المشتركة، ودراسات هندسة الأنسجة، وتصوير الخلايا الحية. تحتفظ خلايا L-929-GFP بالخصائص البيولوجية الأساسية لسلالة الخلايا الليفية الأصلية، مع توفير فائدة معززة لرصد توطين الخلايا وتكاثرها وتفاعلاتها داخل البيئات الخلوية المعقدة. وبالتالي، فهي تُعد نموذجًا متعدد الاستخدامات لدراسة ديناميكيات الخلايا اللحمية، وعمليات التئام الجروح، وتوافق المواد الحيوية، والاستجابات السمية الخلوية التي تتوسطها المناعة.

التعديل الجيني: تم تعديلها بشكل مستقر عن طريق نقل فيروسي لينتيفي غير قادر على التكاثر للتعبير عن بروتين الفلورة الخضراء ZsGreen1 كمؤشر؛ ويتم الحفاظ عليها كمجموعة متعددة النسائل تحت انتقاء البوروميسين (1–5 ميكروغرام/مل). احتواء S1/BSL-1.

الأنسجة
النسيج الضام
المرادفات
  • L929/GL50

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

نوع الخلية
الأرومة الليفية

04المعرّفات

المرجع
L929-GFP (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305956)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_E2Z7

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
ZsGreen1 (البروتين الفلوري الأخضر)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 إلى 3 × 104 خلية/سم2
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل + 10% DMSO للحصول على صلاحية كافية بعد ذوبان الجليد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
100 يوم