Gå direkte til indholdet
L929-GFP
Væv
Bindevæv
Synonymer
L929/GL50

Dokumenter

L929-GFP

Cell line · Varenummer 305956

L-929-GFP-celler er et fluorescensmærket afledt af den murine L-929-fibroblastcellelinje, som oprindeligt blev etableret ud fra subkutan bindevæv...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

L-929-GFP-celler er et fluorescensmærket derivat af den murine L-929-fibroblastcellelinje, som oprindeligt blev etableret ud fra subkutant bindevæv fra en voksen mus. Den oprindelige L-929-linje er en af de mest udbredte musefibroblastmodeller inden for biomedicinsk forskning og er kendetegnet ved sin adhærente vækst, spindelformede morfologi og robuste proliferative evne. L-929-celler anvendes i vid udstrækning i studier af cytotoksicitet, inflammation, ekstracellulær matrixbiologi og vært-patogen-interaktioner, og de bruges også ofte til produktion og bioassay af cytokiner såsom tumornekrosefaktor-α (TNF-α).

Den stabile ekspression af grønt fluorescerende protein (GFP) i L-929-GFP-celler muliggør direkte visualisering og kvantitativ sporing af fibroblasters adfærd i realtid. Disse celler er særligt anvendelige til fluorescensbaserede anvendelser, herunder migrationsassays, co-kulturforsøg, vævsingeniørstudier og levende cellebilleddannelse. L-929-GFP-celler bevarer de centrale biologiske egenskaber fra den oprindelige fibroblastlinje, samtidig med at de giver forbedrede muligheder for overvågning af cellelokalisering, proliferation og interaktioner i komplekse cellulære miljøer. De fungerer derfor som en alsidig model til undersøgelse af stromacelledynamik, sårhelingsprocesser, biomaterialekompatibilitet og immunmedierede cytotoksiske reaktioner.

Genetisk modifikation: Stabilt modificeret ved replikationsinkompetent lentiviral transduktion til at udtrykke ZsGreen1-reporteren (grønt fluorescerende protein); opbevares som en polyklonal population under puromycin-selektion (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-indeslutning.

Væv
Bindevæv
Synonymer
  • L929/GL50

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Celletype
Fibroblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
L929-GFP (Cytion-varenummer 305956)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
ZsGreen1 (grønt fluorescerende protein)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 til 3 x 104 celler/cm2
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium + 10 % DMSO for at opnå tilstrækkelig levedygtighed efter optøning.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
100 dage