Ga naar de inhoud
L929-GFP
Weefsel
Bindweefsel
Synoniemen
L929/GL50

Documenten

L929-GFP

Cell line · Productnummer 305956

L-929-GFP-cellen zijn een fluorescerend gemerkt derivaat van de L-929-fibroblastcellijn van de muis, die oorspronkelijk werd opgezet uit subcutaan bindweefsel...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

L-929-GFP-cellen zijn een fluorescerend gemerkt derivaat van de L-929-fibroblastcellijn van de muis, die oorspronkelijk werd opgezet uit subcutaan bindweefsel van een volwassen muis. De oorspronkelijke L-929-lijn is een van de meest gebruikte fibroblastmodellen van muizen in biomedisch onderzoek en wordt gekenmerkt door zijn hechtende groei, spindelvormige morfologie en robuust proliferatievermogen. L-929-cellen worden op grote schaal gebruikt in onderzoek naar cytotoxiciteit, ontstekingen, extracellulaire matrixbiologie en interacties tussen gastheer en pathogeen, en ze worden ook vaak ingezet voor de productie en bioassay van cytokines zoals tumornecrosefactor-α (TNF-α).

De stabiele expressie van groen fluorescerend eiwit (GFP) in L-929-GFP-cellen maakt directe visualisatie en kwantitatieve tracking van het gedrag van fibroblasten in realtime mogelijk. Deze cellen zijn bijzonder geschikt voor op fluorescentie gebaseerde toepassingen, waaronder migratietests, co-cultuurexperimenten, onderzoek naar weefselengineering en beeldvorming van levende cellen. L-929-GFP-cellen behouden de belangrijkste biologische kenmerken van de oorspronkelijke fibroblastlijn en bieden tegelijkertijd verbeterde mogelijkheden voor het monitoren van cellulaire lokalisatie, proliferatie en interacties binnen complexe cellulaire omgevingen. Daardoor dienen ze als een veelzijdig model voor het onderzoeken van de dynamiek van stromale cellen, wondgenezingsprocessen, de compatibiliteit van biomaterialen en immuungemedieerde cytotoxische reacties.

Genetische modificatie: Stabiel gemodificeerd door replicatie-incompetente lentivirale transductie om het ZsGreen1-groen fluorescerend eiwit (GFP) als reporter te expresseren; in stand gehouden als een polyklonale populatie onder puromycineselectie (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-beveiligingsniveau.

Weefsel
Bindweefsel
Synoniemen
  • L929/GL50

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Celtype
Fibroblast

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
L929-GFP (Cytion-catalogusnummer 305956)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
ZsGreen1 (groen fluorescerend eiwit)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 tot 3 x 104 cellen/cm2
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
100 dagen