Siirry sisältöön
L929-GFP
Kudos
Sidekudos
Synonyymit
L929/GL50

Asiakirjat

L929-GFP

Cell line · Tuotenumero 305956

L-929-GFP-solut ovat fluoresoivasti merkitty johdannainen hiiren L-929-fibroblastisolulinjasta, joka perustettiin alun perin ihonalaisesta sidekudoksesta...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

L-929-GFP-solut ovat fluoresoivasti merkitty johdannainen hiiren L-929-fibroblastisolulinjasta, joka on alun perin perustettu aikuisen hiiren ihonalaisesta sidekudoksesta. Emolinjana toimiva L-929 on yksi biolääketieteellisessä tutkimuksessa laajimmin käytetyistä hiiren fibroblastimalleista, ja sille on ominaista kiinnittyvä kasvu, sukkulanmuotoinen morfologia sekä vahva lisääntymiskyky. L-929-soluja käytetään laajalti sytotoksisuustutkimuksissa, tulehdustutkimuksissa, solunulkoisen matriisin biologiassa sekä isäntä-patogeenivuorovaikutusten tutkimuksissa, ja niitä käytetään yleisesti myös sytokiinien, kuten tuumorinekroositekijä-α:n (TNF-α), tuotantoon ja biologisiin määrityksiin.

Vihreän fluoresoivan proteiinin (GFP) vakaa ilmentyminen L-929-GFP-soluissa mahdollistaa fibroblastien käyttäytymisen suoran visualisoinnin ja kvantitatiivisen seurannan reaaliajassa. Nämä solut ovat erityisen hyödyllisiä fluoresenssipohjaisissa sovelluksissa, kuten migraatiomäärityksissä, yhteisviljelykokeissa, kudostekniikan tutkimuksissa ja elävien solujen kuvantamisessa. L-929-GFP-solut säilyttävät emofibroblastilinjan keskeiset biologiset ominaisuudet ja tarjoavat samalla parannetun käyttökelpoisuuden solujen lokalisoinnin, proliferaation ja vuorovaikutusten seurantaan monimutkaisissa soluympäristöissä. Näin ollen ne toimivat monipuolisena mallina stromasolujen dynamiikan, haavanparanemisprosessien, biomateriaalien yhteensopivuuden ja immuunivälitteisten sytotoksisten vasteiden tutkimiseen.

Geneettinen muuntelu: Solut on muunnettu stabiilisti replikaatiokyvyttömällä lentiviruksen välityksellä ilmentämään ZsGreen1-vihreää fluoresoivaa proteiinia; niitä ylläpidetään polyklonaalisena populaationa puromysiiniselektiossa (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-turvaluokitus.

Kudos
Sidekudos
Synonyymit
  • L929/GL50

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Fibroblastit

04Tunnisteet

Lähdeviite
L929-GFP (Cytion-tuotenumero 305956)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_E2Z7

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
ZsGreen1 (vihreä fluoresoiva proteiini)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
100 päivää