Hep-70.4

Hep-70.4 hepatomos ląstelių linija yra gauta iš pelių kepenų naviko, konkrečiai iš C57BL/6J pelių padermės. Ši ląstelių linija išsiskiria p53 geno mutacijomis, kurios buvo nustatytos įvairiose stadijose dauginant in vitro. Atlikus 8 pakopos analizę, buvo aptiktas silpnas papildomas signalas, rodantis, kad yra p53 mutacija. Iki 38 eilės buvo nustatytos dvi skirtingos p53 taškinės mutacijos: G:C į C:G transversija 135 kodone ir C:G į G:C transversija 5 egzono 138 kodone. Šios mutacijos lėmė aminorūgščių pokyčius, atitinkamai alanino - į proliną ir cisteino - į triptofaną.

Hep-70.4 ląstelių linija pasižymi morfologiniu fenotipu, kuris labai kinta dauginimosi metu. Kai kurios sublinijos pasižymi epitelio morfologija, o kitos - fibroblastų išvaizda. Šis heterogeniškumas atspindi sudėtingą ląstelių linijos prigimtį ir jos gebėjimą prisitaikyti prie skirtingų auginimo sąlygų. Tai, kad ankstyvosiose stadijose yra ir normalių, ir mutavusių p53 alelių, rodo, kad mutacijos suteikia selektyvų augimo pranašumą, todėl ilgainiui vyrauja mutavę klonai.

Atlikus Hep-70.4 ląstelių linijos tarpinių gijų baltymų analizę, nustatyta, kad paprastieji keratinai K8 ir K18, būdingi normalioms kepenų ląstelėms, taip pat vimentinas ir keratinas K19 yra įvairaus laipsnio. Šie baltymų modeliai patvirtina hepatocitinę ląstelių linijos kilmę ir jos priskyrimą hepatomų linijai. Toliau Hep-70.4 genomo stabilumas buvo įvertintas atlikus DNR pirštų atspaudų analizę, kuri neatskleidė jokių didesnių struktūrinių pakitimų, nors didėjant ląstelių skaičiui buvo pastebėti tam tikrų juostų santykinio intensyvumo pokyčiai.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime