Hep-70.4

Hepatómová bunková línia Hep-70.4 je odvodená z nádoru pečene myší, konkrétne z kmeňa C57BL/6J. Táto bunková línia je pozoruhodná svojimi mutáciami v géne p53, ktoré boli identifikované v rôznych fázach počas množenia in vitro. Pri pasáži číslo 8 sa pri analýze polymorfizmu konformácie jedného reťazca (SSCP) zistil slabý dodatočný signál, ktorý naznačuje prítomnosť mutácie p53. Pri pasáži číslo 38 boli identifikované dve odlišné bodové mutácie p53: G:C na C:G transverzia na kodóne 135 a C:G na G:C transverzia na kodóne 138 exónu 5. Tieto mutácie viedli k zmenám aminokyselín z alanínu na prolín a cysteínu na tryptofán.

Bunková línia Hep-70.4 vykazuje morfologický fenotyp, ktorý sa počas jej rozmnožovania výrazne mení. Niektoré sublínie vykazujú epitelovú morfológiu, zatiaľ čo iné vykazujú vzhľad podobný fibroblastom. Táto heterogenita odráža komplexnú povahu bunkovej línie a jej adaptabilitu v rôznych kultivačných podmienkach. Prítomnosť normálnych aj mutovaných alel p53 v prvých pasážach naznačuje, že mutácie poskytujú selektívnu rastovú výhodu, čo časom vedie k prevahe mutovaných klonov.

Analýza proteínov intermediárnych vlákien bunkovej línie Hep-70.4 odhalila expresiu jednoduchých keratínov K8 a K18, ktoré sú typické pre normálne pečeňové bunky, ako aj vimentínu a keratínu K19 v rôznej miere. Tieto proteínové vzorce potvrdzujú hepatocytárny pôvod bunkovej línie a jej klasifikáciu ako hepatómovej línie. Genomická stabilita Hep-70.4 sa ďalej hodnotila prostredníctvom analýzy odtlačkov DNA, ktorá neodhalila žiadne závažné štrukturálne abnormality, hoci sa pozorovali zmeny v relatívnej intenzite určitých pásov so zvyšujúcim sa počtom pasáží.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke