Hep-70.4

Hep-70.4 hepatomas šūnu līnija ir iegūta no peļu aknu audzēja, konkrēti no C57BL/6J peļu celma. Šī šūnu līnija izceļas ar p53 gēna mutācijām, kas tika konstatētas dažādos in vitro pavairošanas posmos. Pie 8. pasāžas tika konstatēts vājš papildu signāls, veicot viena virknes konformācijas polimorfisma (SSCP) analīzi, kas norāda uz p53 mutācijas klātbūtni. Līdz 38. pārejai tika konstatētas divas atšķirīgas p53 punktmutācijas: G:C uz C:G transversija pie 135. kodona un C:G uz G:C transversija pie 138. kodona 5. eksonā. Šīs mutācijas izraisīja aminoskābju maiņu attiecīgi no alanīna uz prolīnu un no cisteīna uz triptofānu.

Hep-70.4 šūnu līnija uzrāda morfoloģisku fenotipu, kas tās pavairošanas laikā ievērojami mainās. Dažām apakšlīnijām piemīt epitēlija morfoloģija, bet citām - fibroblastiem līdzīgs izskats. Šī heterogenitāte atspoguļo šūnu līnijas sarežģīto raksturu un tās pielāgošanās spēju dažādos kultivēšanas apstākļos. Gan normālu, gan mutējušu p53 alēļu klātbūtne agrīnajās pasāžās liecina, ka mutācijas piešķir selektīvu augšanas priekšrocību, kas laika gaitā noved pie mutēto klonu pārsvara.

Hep-70.4 šūnu līnijas starpfilamentu proteīnu analīze atklāja normālām aknu šūnām raksturīgo vienkāršo keratīnu K8 un K18, kā arī vimentīna un keratīna K19 ekspresiju dažādās pakāpēs. Šie proteīnu modeļi apstiprina šūnu līnijas hepatocītisko izcelsmi un tās klasifikāciju kā hepatomas līniju. Hep-70.4 genoma stabilitāti novērtēja arī ar DNS pirkstu nospiedumu analīzes palīdzību, kas neatklāja nekādas būtiskas strukturālas anomālijas, lai gan, palielinoties pasāžu skaitam, tika novērotas dažu joslu relatīvās intensitātes izmaiņas.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu