Hep-70.4

Hepatomcellinjen Hep-70.4 härrör från en levertumör från en mus, närmare bestämt från musstammen C57BL/6J. Denna cellinje är anmärkningsvärd för sina mutationer i p53-genen, vilka identifierades vid olika passager under in vitro-förökning. Vid passage nummer 8 upptäcktes en svag tilläggssignal i SSCP-analysen (single-strand conformation polymorphism), vilket indikerade förekomsten av en p53-mutation. Vid passage nummer 38 identifierades två distinkta punktmutationer i p53: en G:C till C:G-transversion vid kodon 135 och en C:G till G:C-transversion vid kodon 138 i exon 5. Dessa mutationer ledde till aminosyraförändringar från alanin till prolin respektive cystein till tryptofan.

Cellinjen Hep-70.4 uppvisar en morfologisk fenotyp som varierar avsevärt under dess spridning. Vissa sublinjer uppvisar en epitelial morfologi, medan andra uppvisar ett fibroblastliknande utseende. Denna heterogenitet återspeglar cellinjens komplexa natur och dess anpassningsförmåga under olika odlingsförhållanden. Förekomsten av både normala och muterade p53-alleler i de tidiga passagerna tyder på att mutationerna ger en selektiv tillväxtfördel, vilket leder till en övervikt av muterade kloner med tiden.

Proteinanalys av intermediära filament i cellinjen Hep-70.4 visade uttryck av enkla keratiner K8 och K18, som är typiska för normala leverceller, samt vimentin och keratin K19 i varierande grad. Dessa proteinmönster bekräftar cellinjens hepatocytiska ursprung och dess klassificering som en hepatomlinje. Den genomiska stabiliteten hos Hep-70.4 utvärderades ytterligare genom DNA-fingeravtrycksanalys, som inte avslöjade några större strukturella avvikelser, även om förändringar i den relativa intensiteten hos vissa band observerades med ökande passageantal.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring