Hep-70.4

A Hep-70.4 hepatóma sejtvonal egér májtumorból származik, kifejezetten a C57BL/6J egértörzsből. Ez a sejtvonal a p53 gén mutációiról nevezetes, amelyeket az in vitro szaporítás során különböző passzázsokban azonosítottak. A 8. passzázsnál az egyszálú konformációs polimorfizmus (SSCP) analízis során gyenge kiegészítő jelet észleltek, ami p53 mutáció jelenlétére utal. A 38. passzázsszámig két különböző p53 pontmutációt azonosítottak: egy G:C-ről C:G-re történő transzverziót a 135-ös kodonnál és egy C:G-ről G:C-re történő transzverziót az 5. exon 138-as kodonjánál. Ezek a mutációk aminosavváltozásokat eredményeztek: alaninról prolinra, illetve ciszteinről triptofánra.

A Hep-70.4 sejtvonal morfológiai fenotípust mutat, amely szaporodása során jelentősen változik. Egyes alvonalak epiteliális morfológiát mutatnak, míg mások fibroblaszt-szerű megjelenést mutatnak. Ez a heterogenitás a sejtvonal összetett természetét és a különböző tenyésztési körülmények közötti alkalmazkodóképességét tükrözi. A normális és mutáns p53 allélok jelenléte a korai passzázsokban arra utal, hogy a mutációk szelektív növekedési előnyt biztosítanak, ami idővel a mutáns klónok túlsúlyához vezet.

A Hep-70.4 sejtvonal intermedier filamentum fehérjeanalízise kimutatta a normális májsejtekre jellemző K8 és K18 egyszerű keratinok, valamint a vimentin és a K19 keratin különböző mértékű expresszióját. Ezek a fehérjemintázatok megerősítik a sejtvonal hepatocita eredetét és hepatóma vonalnak való besorolását. A Hep-70.4 genomikai stabilitását DNS-ujjlenyomat-elemzéssel vizsgáltuk tovább, amely nem mutatott ki jelentős szerkezeti eltéréseket, bár a passzázsszám növekedésével egyes sávok relatív intenzitásának változásait figyeltük meg.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban