Hep-70.4

Hep-70.4 hepatoomi rakuliin on saadud hiirte maksakasvajast, täpsemalt C57BL/6J hiirtüvest. See rakuliin on märkimisväärne p53-geeni mutatsioonide poolest, mis tuvastati erinevates etappides in vitro paljundamise käigus. Passaaži nr 8 juures tuvastati üksikahela konformatsioonipolümorfismi (SSCP) analüüsis nõrk lisasignaal, mis viitab p53-mutatsiooni olemasolule. Passaažinumbril 38 tuvastati kaks erinevat p53 punktmutatsiooni: G:C-lt C:G-transversioon koodonis 135 ja C:G-lt G:C-transversioon ekson 5 koodonis 138. Seejuures tuvastati kaks p53 punktmutatsiooni: G:C-lt C:G-transversioon ekson 5 koodonis 138. Need mutatsioonid põhjustasid aminohapete muutumise vastavalt alaniinist proliiniks ja tsüsteiinist trüptofaaniks.

Hep-70.4 rakuliinil on morfoloogiline fenotüüp, mis varieerub oluliselt selle paljunemise ajal. Mõned alaliigid on epiteeli morfoloogiaga, teised aga fibroblastilaadse välimusega. Selline heterogeensus peegeldab rakuliini keerulist olemust ja selle kohanemisvõimet erinevates kasvatustingimustes. Nii normaalsete kui ka muteerunud p53-alleelide esinemine varajases faasis viitab sellele, et mutatsioonid annavad selektiivse kasvueelise, mis viib aja jooksul muteerunud kloonide domineerimiseni.

Hep-70.4 rakuliini vahepealsete filamentide valkude analüüs näitas normaalsetele maksarakkudele iseloomulike lihtsate keratiinide K8 ja K18, samuti vimentiini ja keratiini K19 ekspressiooni erineval määral. Need valgumustrid kinnitavad rakuliini hepatotsütaarset päritolu ja selle liigitamist hepatoomiliiniks. Hep-70.4 genoomi stabiilsust hinnati täiendavalt DNA sõrmejälje analüüsi abil, mis ei näidanud mingeid olulisi struktuurilisi kõrvalekaldeid, kuigi teatud ribade suhtelise intensiivsuse muutusi täheldati läbimise arvu suurenemisel.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest