Hep-70.4

Hep-70.4 hepatomcellelinjen stammer fra en muselevertumor, specifikt fra C57BL/6J-musestammen. Denne cellelinje er bemærkelsesværdig for sine mutationer i p53-genet, som blev identificeret ved forskellige passager under in vitro-opformering. Ved passage nummer 8 blev der opdaget et svagt ekstra signal i SSCP-analysen (single-strand conformation polymorphism), hvilket indikerede tilstedeværelsen af en p53-mutation. Ved passage nummer 38 blev der identificeret to forskellige p53-punktmutationer: en G:C til C:G-transversion ved codon 135 og en C:G til G:C-transversion ved codon 138 i exon 5. Disse mutationer førte til aminosyreændringer fra henholdsvis alanin til prolin og cystein til tryptofan.

Hep-70.4-cellelinjen udviser en morfologisk fænotype, der varierer betydeligt i løbet af dens formering. Nogle sublinjer udviser en epitelial morfologi, mens andre har et fibroblastlignende udseende. Denne heterogenitet afspejler cellelinjens komplekse natur og dens tilpasningsevne under forskellige dyrkningsforhold. Tilstedeværelsen af både normale og muterede p53-alleler i de tidlige passager tyder på, at mutationerne giver en selektiv vækstfordel, hvilket fører til en overvægt af muterede kloner med tiden.

Intermediær filamentproteinanalyse af Hep-70.4-cellelinjen afslørede ekspression af simple keratiner K8 og K18, som er typiske for normale leverceller, samt vimentin og keratin K19 i varierende grad. Disse proteinmønstre bekræfter cellelinjens hepatocytiske oprindelse og dens klassificering som en hepatomlinje. Den genomiske stabilitet af Hep-70.4 blev yderligere vurderet ved hjælp af DNA-fingeraftryksanalyse, som ikke afslørede nogen større strukturelle abnormiteter, selvom der blev observeret ændringer i den relative intensitet af visse bånd med stigende antal passager.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring