Hep-70.4

Hepatomová buněčná linie Hep-70.4 je odvozena z myšího jaterního nádoru, konkrétně z myšího kmene C57BL/6J. Tato buněčná linie je pozoruhodná svými mutacemi v genu p53, které byly identifikovány v různých fázích během in vitro množení. Při pasáži číslo 8 byl při analýze jednořetězcového konformačního polymorfismu (SSCP) zjištěn slabý dodatečný signál, který naznačuje přítomnost mutace p53. V pasáži číslo 38 byly identifikovány dvě odlišné bodové mutace p53: transverze G:C na C:G v kodonu 135 a transverze C:G na G:C v kodonu 138 exonu 5. Tyto mutace vedly ke změnám aminokyselin z alaninu na prolin a cysteinu na tryptofan.

Buněčná linie Hep-70.4 vykazuje morfologický fenotyp, který se během jejího množení výrazně mění. Některé sublinie vykazují epiteliální morfologii, zatímco jiné vykazují vzhled podobný fibroblastům. Tato heterogenita odráží komplexní povahu buněčné linie a její adaptabilitu za různých kultivačních podmínek. Přítomnost normálních i mutovaných alel p53 v raných pasážích naznačuje, že mutace poskytují selektivní růstovou výhodu, což vede k převaze mutovaných klonů v průběhu času.

Analýza proteinů intermediárních vláken buněčné linie Hep-70.4 odhalila expresi jednoduchých keratinů K8 a K18, které jsou typické pro normální jaterní buňky, a také vimentinu a keratinu K19 v různé míře. Tyto proteinové vzorce potvrzují hepatocytární původ buněčné linie a její zařazení mezi hepatomové linie. Genomická stabilita Hep-70.4 byla dále hodnocena pomocí analýzy otisků DNA, která neodhalila žádné závažné strukturální abnormality, ačkoli s rostoucím počtem pasáží byly pozorovány změny v relativní intenzitě některých pásů.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení