Hep-70.4

Hepatomska celična linija Hep-70.4 je pridobljena iz tumorja jeter miši, natančneje iz seva C57BL/6J. Ta celična linija se odlikuje po mutacijah gena p53, ki so bile ugotovljene v različnih fazah med razmnoževanjem in vitro. Pri prehodu številka 8 je bil pri analizi polimorfizma z enoverižno konformacijo (SSCP) zaznan šibek dodatni signal, ki kaže na prisotnost mutacije p53. Pri prehodu številka 38 sta bili ugotovljeni dve različni točkovni mutaciji p53: transverzija G:C v C:G na kodonu 135 in transverzija C:G v G:C na kodonu 138 eksona 5. Ti mutaciji sta povzročili spremembe aminokislin iz alanina v prolin oziroma iz cisteina v triptofan.

Celična linija Hep-70.4 ima morfološki fenotip, ki se med razmnoževanjem znatno spreminja. Nekatere podlinje imajo epitelijsko morfologijo, druge pa fibroblastni videz. Ta heterogenost odraža kompleksno naravo celične linije in njeno prilagodljivost v različnih pogojih gojenja. Prisotnost normalnih in mutiranih alelov p53 v zgodnjih fazah kaže, da mutacije dajejo selektivno prednost pri rasti, zaradi česar sčasoma prevladujejo mutirani kloni.

Analiza proteinov vmesnih filamentov celične linije Hep-70.4 je pokazala izražanje preprostih keratinov K8 in K18, ki sta značilna za normalne jetrne celice, pa tudi vimentina in keratina K19 v različnih stopnjah. Ti proteinski vzorci potrjujejo hepatocitni izvor celične linije in njeno uvrstitev med hepatomske linije. Genomska stabilnost Hep-70.4 je bila nadalje ocenjena z analizo prstnih odtisov DNA, ki ni razkrila nobenih večjih strukturnih nepravilnosti, čeprav so bile s povečevanjem števila prehodov opažene spremembe v relativni intenzivnosti nekaterih pasov.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo